[发明专利]木薯体细胞胚胎发生再生植株快繁方法

权利要求书

1.一种非基因型依赖的木薯组织培养再生植株快速成苗的方法。其特征如下：

a.用任意基因型植株带有侧芽的茎段进行培养诱导不定芽，利用不定芽分化再生小植株并生根成苗。其中采用的基本培养基是MS培养基，以及附加适度浓度的GA，NAA激素；

b.用大多数基因型无菌苗的嫩叶、茎尖和腋芽进行分化培养诱导愈伤化组织，并挑取胚性愈伤组织诱导胚状体发生及植株再生。其中采用的基本培养基是MS培养基，并附加适度浓度的激素2，4-D或Picloram，BA等。

2.如权利要求1.a所述，用带有侧芽的茎段进行离体培养和快速繁殖的方法，其特征在于：不定芽诱导及分化再生小植株所需附加的激素GA浓度0.01～0.05mg/L，NAA的浓度是0.01～0.04mg/L。

3.如权利要求1.a所述，用带有侧芽的茎段进行离体培养和快速繁殖的方法，其特征在于：植株生根所需附加激素NAA的浓度为0.02mg/L。

4.如权利要求1.b所述，用无菌苗的嫩叶、茎尖和腋芽进行愈伤组织诱导和体细胞胚胎发生及植株再生的方法，其特征在于：诱导愈伤组织及体细胞胚所需附加激素2，4-D浓度为3～5mg/L或Picloram为10～13mg/L。

5.如权利要求1.b所述，用无菌苗的嫩叶、茎尖和腋芽进行愈伤组织诱导和体细胞胚胎发生及植株再生的方法，其特征在于：体细胞胚胎成熟培养阶段所需附加激素BA浓度0.1～0.3mg/L。

6.如权利要求1.b所述，用无菌苗的嫩叶、茎尖和腋芽诱导愈伤组织和体细胞胚胎发生及植株再生的方法，其特征在于：体细胞胚胎诱导及成熟阶段需要附加蔗糖的浓度为20g/L。

7.如权利要求1.b所述，用无菌苗的嫩叶、茎尖和腋芽进行愈伤组织诱导和体细胞胚胎发生及植株再生的方法，其特征在于：再生植株培养阶段需附加激素组合及浓度值为BA0.01～0.03mg/L+GA 0.01～0.05mg/L+NAA 0.01～0.04mg/L。

8.一种木薯试管苗温室二步炼苗的方法，步骤如下：室内培养生根试管苗5～6周后，移至遮荫度60％的大棚进行炼苗。2周后，将小苗取出试管，用清水洗净附着在根系上的培养基，用0.2％多菌灵浸泡0.5h后直接再栽到装满营养土(先装营养土再覆盖两至三公分河沙)的营养杯中，浇透定根水，然后覆盖上塑料薄膜保水保湿。1周左右小苗恢复生长，以后按一般常规小苗管理方法管理。