[发明专利]保守序列扩增多态性分子标记及其分析方法

权利要求书

1.一种保守序列扩增多态性分子标记，其特征在于：是根据表达序列标签EST和内含子的保守序列设计引物的PCR扩增产物。

2.根据权利要求1所述的保守序列扩增多态性分子标记，其特征在于：所述的引物包括固定引物和随机引物，该固定引物根据目标EST设计，该随机引物的核心序列为CACGC。

3.根据权利要求2所述的保守序列扩增多态性分子标记，其特征在于：所述的固定引物的序列如下：

E1：5’ATTCAGCCGATTGCAAGAGA 3’/CV171606

E2：5’TATCTTGACCAGGCGAGACCT 3’/CV171904。

4.根据权利要求2所述的保守序列扩增多态性分子标记，其特征在于：所述的随机引物的序列如下：

C1：5’GACTGCGTACGCACGCTGA 3’

C2：5’GACTGCGTACGCACGCTGA 3’

C3：5’GACTGCGTACGCACGC AAC3’。

5.一种如权利要求1所述的保守序列扩增多态性分子标记的分析方法，其特征在于：分析方法包括以下步骤：

(1).设计固定引物和随机引物；

(2).合成引物：应用DNA合成仪合成设计好的引物；

(3).DNA提取；

(4).PCR扩增：利用设计的引物和提取的DN模板，选择反应条件和反应体系进行PCR；

(5).扩增产物的检测：PCR扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳；

(6).数据的采集与分析：非荧光标记引物银染以显示扩增条带，将条带进行统计，用于数据分析；荧光标记引物直接在共聚焦荧光扫描仪上扫描检测，进行数据分析。

6.根据权利要求5所述的保守序列扩增多态性分子标记的分析方法，其特征在于：所述的随机引物和固定引物的组合为：

C1/E1，C1/E2；C2/E1，C2/E2；C3/E1，C3/E2。

7.根据权利要求5所述的保守序列扩增多态性分子标记的分析方法，其特征在于：所述的固定引物和随机引物可以应用荧光标记。