[发明专利]一种深海鳕鱼皮萃取胶原蛋白小肽冻干粉的方法

权利要求书

1.一种深海鳕鱼皮萃取胶原蛋白小肽的制备方法，其特征在于：

1)深海鳕鱼皮的预处理：新鲜或冰冻的鳕鱼皮浸泡后，组织分解成流体备用；

2)生物酶解：

2.1复合酶解：将预处理后的鳕鱼皮浆料，置于真空生物反应釜内，控制温度为38℃-58℃、pH值为6-8，按每千克鳕鱼皮重量加入2-3g的复合蛋白酶，3-6g的1398中性蛋白酶，1-2g的1203脂肪酶，0.4-0.8g的乳酸菌素，2-4g的Vc，真空度控制在100-200Pa，搅拌下复合酶解反应10-20h，然后用200-300目的双联过滤器分离出杂质，得复合酶解胶原蛋白液；所述复合蛋白酶为丹麦诺维信功能食品工业生产的protamex；

2.2定向酶修饰：复合酶解胶原蛋白液吸入至生物酶修饰反应釜中，调整pH值为6-8，温度38℃-58℃，按每千克鳕鱼皮重量加入1.8g-2.8g的复合风味蛋白酶，0.4-1.6g的磷脂酯酰基水解酶，控制真空度为300-500Pa，搅拌酶修饰反应10-20h，得胶原蛋白小肽酶解液；所述复合风味蛋白酶为丹麦诺维信功能食品工业生产的Flavourzyme；

2.3灭酶：灭酶温度控制138℃-148℃，瞬间高温灭酶后备用；

3)蛋白小肽的分离纯化：

3.1脱腥脱色：将灭酶后的胶原蛋白小肽酶解液，采用真空度100Pa-200Pa吸入真空脱腥脱色，罐内加入酶解蛋白小肽液体重量比例的2-3％活性碳、1-3％的高岭活性白土，温度控制在40℃-60℃，真空度为100Pa-200Pa，搅拌脱腥脱色60-180min，得脱腥脱色酶解蛋白小肽复合液；

3.2离心分离：将脱腥脱色后的酶解蛋白小肽复合液以6000-12000r/min的速度分离10-15min，将上层液和中层液合并输入稀释罐内，即得胶原蛋白小肽母液，下层废液被分离出去；

3.3稀释：将分离后得到的胶原蛋白小肽母液按1∶1-3重量比例加入蒸馏水或纯净水，搅拌成稀释液；

3.4超微膜纯化：将胶原蛋白小肽稀释液通过0.2μm-1.0μm的微滤器和200-3000Da的超微膜机粗纯化蛋白小肽分子，获得分子量小于等于3000Da蛋白小肽液；

3.5真空热隔膜浓缩：将蛋白小肽液在真空度60Pa-120Pa，蒸发温度为60℃-80℃，除去40-70％的水份，获得蛋白小肽浓缩液；

4)冷冻干燥获得深海鳕鱼皮萃取的胶原蛋白小肽冻干粉。

2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于：所述深海鳕鱼皮的预处理过程为，

1.1深海鳕鱼皮的选择：选用新鲜或冷冻的鳕鱼皮，用鳕鱼皮重量比例 1∶2-4倍食用水在8℃-20℃条件下浸泡8-12小时，然后剔出鱼皮下组织，清洗干净；再将鳕鱼皮置于槽内，加入鱼皮重量的2-4倍浓度2-3％的Ca(OH)₂水溶液，控制温度为18℃-26℃；并向槽内注入压缩空气，在水槽内产生气泡，维持8-12小时，捞出鳕鱼皮沥干；

1.2将沥干的鳕鱼皮用绞肉机绞碎，置于不锈钢桶内加鳕鱼皮重量比1∶2-4倍纯净水，搅拌均匀后磨成浆状备用。

3.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于：所述冷冻干燥的过程为：将蛋白小肽浓缩液输入盘中，液体厚度为20mm-40mm；在-35℃～-50℃中冻成固态，加热器温度控制在1℃～70℃，冷阱温度为-35℃～-40℃，真空度20Pa-100Pa中升华干燥18～24小时；获得深海鳕鱼皮萃取的胶原蛋白小肽冻干粉。