[发明专利]一种深海鳕鱼皮萃取胶原蛋白小肽冻干粉的方法

说明书

技术领域

本发明涉及深海鳕鱼的深加工，具体地说是用深海鳕鱼皮萃取胶原蛋白小肽冻干粉的方法。

背景技术

深海鳕鱼皮深加工鳕鱼片过程中，剔出的16％-20％余料成为废弃物，鳕鱼皮中含有较高的胶原蛋白质，而且这种蛋白具有促进人体表皮和真皮组织细胞的生长，也能富于人体皮肤弹性和活力。但大部分鳕鱼皮被当作粗蛋白饲料处理掉，造成深海生物资源的浪费。经研究用深海鳕鱼皮做原料，采用海洋生物核心技术萃取胶原蛋白小肽。提高了鳕鱼皮的附加值，也为鳕鱼皮向高档营养食品迈进开拓了一条新途径。

发明内容

本发明的目的是提供深海鳕鱼皮萃取胶原蛋白小肽冻干粉的制备方法，使废弃的鳕鱼皮中的生物蛋白质得到更广泛的应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种深海鳕鱼皮萃取胶原蛋白小肽的制备方法：

1.深海鳕鱼皮的预处理

1.1深海鳕鱼皮的选择：选用新鲜或冷冻的鳕鱼皮，用鳕鱼皮重量比例1∶2-4倍食用水在8℃-20℃条件下浸泡8-12小时，然后用刀剔出鱼皮下组织，清洗干净。在将鳕鱼皮置于不锈钢槽内，加入鱼皮重量的2-4倍2-3％的Ca(OH)₂水溶液，控制温度为18℃-26℃；并向槽内注入50pa-200pa的压缩空气，在水槽内产生气泡，维持8-12小时，捞出鳕鱼皮沥干；

1.2将沥干的鳕鱼皮用绞肉机绞碎，置于不锈钢桶内加鳕鱼皮重量比倒入1∶2-4倍纯净水，搅拌均匀后，加入胶体磨中磨成浆状备用。

2.生物酶解

2.1复合酶解：将预处理后的鳕鱼皮浆料，置于真空生物反应釜内，控制温度为38℃-58℃/PH值为6-8，按每千克鳕鱼皮重量体积加入2-3g的复合蛋白酶(丹麦诺维信功能食品工业生产protamex)3-6g1398中性蛋白酶、1-2g1203脂肪酶、0.4-0.8g乳酸菌素、2-4gVc，真空度控制在100-200Pa，搅拌下复合酶解反应10-20h，然后用200-300目的双联过滤器分离出杂质，在复合酶解反应下，使鳕鱼皮组织细胞被降解，胶原蛋白质大分子链被酶切下来，得复合酶解胶原蛋白液；

2.2定向酶修饰：经复合酶解液体内胶原蛋白与胶原蛋白肽形成蛋白大分子复合液体；为使小分子结构的胶原蛋白复合液体用100pa-200pa的真空吸入至生物酶修饰反应釜中；调整PH值为6-8，温度38℃-58℃，加入鳕鱼皮重量体积的1.8g-2.8g/kg的复合风味蛋白酶(丹麦诺维信功能食品工业生产的Flavourzyme)、0.4-1.6g/kg的磷脂酯酰基水解酶(俗称：磷脂酶A)控制真空温度为300-500pa。搅拌酶修饰反应10-20h，得胶原蛋白小肽酶解液；

2.3灭酶：灭酶温度控制138℃-148℃，瞬间高温灭酶，然后灭酶后的酶解蛋白小肽液体输入到平衡炉内备用。

3.蛋白小肽的分离纯化

3.1脱腥脱色：将灭酶后的酶解蛋白小肽复合液，采用真空度100pa-200pa吸入真空脱腥脱色，罐内加入酶解蛋白小肽液体重量比例的2-3％活性碳，1-3％的高岭活性白土，温度控制在40℃-60℃，真空度为100pa-200pa，搅拌脱腥脱色60min-180min，得脱腥脱色酶解蛋白小肽复合液；

3.2离心分离：采用高速蝶式离心机将脱腥脱色后的酶解蛋白小肽复合液以6000-12000r/min的速度分离10-15min，将上层液和中层液合并输入稀释罐内，即得胶原蛋白小肽母液，下层废液被分离出去；

3.3稀释：将分离胶原蛋白小肽母液按1∶1-3重量比例加入蒸馏水或纯净水，在真空度50-100pa，搅拌10-30min成稀释液；

3.4超微膜纯化：将胶原蛋白小肽稀释液用循环泵在300pa-800pa压力下通过0.2um-1.0um的微滤器和200-3000Da的超微膜机粗纯化蛋白小肽分子，获得分子量小于等于3000Da蛋白小肽液；

3.5真空热隔膜浓缩：将蛋白小肽液采用真空热隔膜蒸发浓缩器，在真空度60pa-120pa，蒸发温度为60℃-80℃，除去70％的水份，获得30％的蛋白小肽浓缩液。

4.冷冻干燥

4.1将蛋白小肽浓缩液，采用定量分流器输入不锈钢盘中，液体厚度为20mm-40mm。在-35℃～-50℃中冻成固态，加热器温度控制在1℃～70℃，冷阱温度为-35℃～-40℃，真空度20pa-100pa中升华干燥18～24小时。获得深海鳕鱼皮萃取的胶原蛋白小肽冻干粉。

本发明的积极效果：