[发明专利]人白细胞介素-15的生产方法无效
申请号: | 200710162967.X | 申请日: | 2007-09-28 |
公开(公告)号: | CN101165185A | 公开(公告)日: | 2008-04-23 |
发明(设计)人: | 黄阳滨;任军;徐晓燕 | 申请(专利权)人: | 上海新生源医药研究有限公司 |
主分类号: | C12N15/24 | 分类号: | C12N15/24;C12N15/63;C12N15/74;C12N1/20;C12P21/02 |
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地址: | 200031上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 白细胞 15 生产 方法 | ||
1.一种人白细胞介素-15的生产方法,其特征在于,该方法包括步骤:
a)在适合的表达条件下,在摇瓶中培养宿主细胞,从而以包涵体形式表达出人IL-15;
b)在适合的表达条件下,在发酵罐中大规模的进行生产。
2.如权利要求1所述的宿主细胞,其特征在于,它是大肠杆菌。
3.如权利要求1所述的宿主细胞,其特征在于,它含有一种原核表达载体。
4.如权利要求3所述的表达载体,其特征在于,它是含有编码人白细胞介素-15的核苷酸序列。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(a)所示的表达条件为:较佳培养基为改良M9-5培养基,摇瓶水平诱导起始菌密度选择在OD6003~5之间,诱导温度为42℃,诱导pH为6.8~7.2,诱导时间在3~4小时的范围为最佳,并且补料以选择Yeast extract和葡萄糖作为IL-15表达的首选补料搭配。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(b)所示的表达条件为:诱导OD600控制在1.2~2之间较佳,温度37℃,DO≥50%,OD600 1.2~2时用1mM的IPTG开始诱导,pH控制在6.8~7.2,诱导最佳时间应为3~4hr。
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