[发明专利]人白细胞介素-15的生产方法无效

专利信息
申请号: 200710162967.X 申请日: 2007-09-28
公开(公告)号: CN101165185A 公开(公告)日: 2008-04-23
发明(设计)人: 黄阳滨;任军;徐晓燕 申请(专利权)人: 上海新生源医药研究有限公司
主分类号: C12N15/24 分类号: C12N15/24;C12N15/63;C12N15/74;C12N1/20;C12P21/02
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 200031上海市*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 白细胞 15 生产 方法
【权利要求书】:

1.一种人白细胞介素-15的生产方法,其特征在于,该方法包括步骤:

a)在适合的表达条件下,在摇瓶中培养宿主细胞,从而以包涵体形式表达出人IL-15;

b)在适合的表达条件下,在发酵罐中大规模的进行生产。

2.如权利要求1所述的宿主细胞,其特征在于,它是大肠杆菌。

3.如权利要求1所述的宿主细胞,其特征在于,它含有一种原核表达载体。

4.如权利要求3所述的表达载体,其特征在于,它是含有编码人白细胞介素-15的核苷酸序列。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(a)所示的表达条件为:较佳培养基为改良M9-5培养基,摇瓶水平诱导起始菌密度选择在OD6003~5之间,诱导温度为42℃,诱导pH为6.8~7.2,诱导时间在3~4小时的范围为最佳,并且补料以选择Yeast extract和葡萄糖作为IL-15表达的首选补料搭配。

6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(b)所示的表达条件为:诱导OD600控制在1.2~2之间较佳,温度37℃,DO≥50%,OD600 1.2~2时用1mM的IPTG开始诱导,pH控制在6.8~7.2,诱导最佳时间应为3~4hr。

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