[发明专利]一种从积雪草总皂苷出发同时制备积雪草苷A与积雪草苷B的方法

权利要求书

1.一种从积雪草总皂苷出发同时制备积雪草苷A与积雪草苷B的方法，方法的步骤如下：

1)积雪草总皂苷用甲醇溶解后加入硅胶混合搅拌均匀，蒸干后得拌样硅胶，积雪草总皂苷与硅胶的质量比例为0.05～0.2∶1；

2)层析柱中依序加入硅胶和拌样硅胶，采用干法装柱，干法层析柱的高径比为3～9，硅胶与拌样硅胶的高度比为3～8；

3)以有机溶剂I-有机溶剂II-水三元混合溶剂为流动相，以0.5～3床层体积/h的流速洗脱；

4)洗脱液经TLC分析后合并成三个馏分，馏分1为积雪草苷溶液，馏分2为积雪草苷、积雪草苷A、积雪草苷B的混合溶液，馏分3为积雪草苷A与积雪草苷B的混合溶液；

5)将馏分3真空浓缩、真空干燥后用乙腈-水混合溶剂溶解、过滤后得滤液；

6)C18硅胶采用湿法装柱，柱子的高径比为4～12，用乙腈-水混合溶剂相冲洗柱子；

7)滤液按0.01～0.1g积雪草苷A与积雪草苷B的混合物/1g C18硅胶的比例上样，乙腈-水混合溶剂以0.5～3床层体积/h的流速洗脱；

8)洗脱液经HPLC分析后合并成三个馏分，馏分4为积雪草苷B溶液，馏分5为积雪草苷B与积雪草苷A的混合溶液，馏分6为积雪草苷A溶液，馏分4与馏分6经真空浓缩、结晶、真空干燥后分别得积雪草苷B与积雪草苷A产品；

9)C18柱经乙腈-水混合溶剂冲洗再生后可再次上样。

2.根据权利要求1所述的一种从积雪草总皂苷出发同时制备积雪草苷A与积雪草苷B的方法，其特征在于所述步骤1)中以0.08～0.15g积雪草总皂苷/1g硅胶的比例加入硅胶搅拌均匀。

3.根据权利要求1所述的一种从积雪草总皂苷出发同时制备积雪草苷A与积雪草苷B的方法，其特征在于所述步骤3)中有机溶剂I为氯仿或二氯甲烷或乙酸乙酯。

4.根据权利要求1所述的一种从积雪草总皂苷出发同时制备积雪草苷A与积雪草苷B的方法，其特征在于所述步骤3)中有机溶剂II为甲醇或乙醇。

5.根据权利要求1所述的一种从积雪草总皂苷出发同时制备积雪草苷A与积雪草苷B的方法，其特征在于所述步骤3)有机溶剂I-有机溶剂II-水三元混合溶剂中有机溶剂I的体积浓度为60～80％。

6.根据权利要求1所述的一种从积雪草总皂苷出发同时制备积雪草苷A与积雪草苷B的方法，其特征在于所述步骤3)有机溶剂I-有机溶剂II-水三元混合溶剂中有机溶剂II的体积浓度为18～38％。

7.根据权利要求1所述的一种从积雪草总皂苷出发同时制备积雪草苷A与积雪草苷B的方法，其特征在于所述步骤3)有机溶剂I-有机溶剂II-水三元混合溶剂中水的体积浓度为2～10％。

8.根据权利要求1所述的一种从积雪草总皂苷出发同时制备积雪草苷A与积雪草苷B的方法，其特征在于所述步骤5)、步骤6)、步骤7)中乙腈-水混合溶剂中乙腈的体积浓度为10～30％。

9.根据权利要求1所述的一种从积雪草总皂苷出发同时制备积雪草苷A与积雪草苷B的方法，其特征在于所述步骤7)中滤液按0.02～0.06g积雪草苷A与积雪草苷B的混合物/1g C18硅胶的比例上样。

10.根据权利要求1所述的一种从积雪草总皂苷出发同时制备积雪草苷A与积雪草苷B的方法，其特征在于所述步骤9)中C18柱再生过程为依次用体积浓度为80～95％的乙腈-水和10～30％的乙腈-水混合溶剂冲洗。