[发明专利]丹酚酸B纯品的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及从中药丹参中提取、分离、精制丹酚酸B的方法。

背景技术

丹参为常用中药，始载于《神农本草经》，列为上品。中国药典(2005年版)规定丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。

丹酚酸B是丹参中水溶性有效成分之一，中国药典(2005年版)将丹酚酸B的含量(大于3％)作为丹参的质量标准，说明丹酚酸B是丹参中最主要的活性成分。丹酚酸B具有多方面的药理作用。(1)保护脑血管，(2)保护肝细胞，(3)抗动脉粥样硬化，(4)保护心肌缺血再灌注损伤，(5)治疗心肌梗死，(6)对家兔全血粘度、红细胞压积和聚集指数有明显的降低作用。

目前，制备丹酚酸B的专利主要有五项：

申请号：200610200682.6微波提取加聚酰胺柱分离

申请号：02160771.0大孔吸附树脂柱分离

申请号：02137375.2先用大孔吸附树脂柱分离，后用聚酰胺柱分离

申请号：03151476.6先用壳聚糖絮凝，后用有机溶剂萃取，最后用硅胶柱分离。

申请号：200610170981.X醚萃取加逆流色谱分离

这五项专利所制备的丹酚酸B，其纯度达不到98％，而且有的专利不适合工业化生产。

本发明提供的方法，即能使丹酚酸B的纯度达到98％(中检所标准品标定)，又适合工业化生产，而且成本低，环境污染小。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供一种成本低、纯度高、产率高，可以工业化生产的丹酚酸B(纯度大于或等于98％)的制备方法。用外标一点法计算，标准品由中国生物制品检定所提供。

本发明的丹酚酸B的制备方法，基本是由丹参用酸水提取，聚酰胺柱分离，大孔吸附树脂柱分离，溶剂法精制，Sephadex LH-20柱或反相硅胶柱分离等几个步骤组成。

本发明通过下述技术方案予以实施：

(a)丹参去杂质，用PH值小于4的酸水浸渍，滤过；

(b)滤液上聚酰胺柱，用含水或无水低级醇洗脱除杂质，然后用水洗聚酰胺柱，将低级醇洗净后，用碱性水溶液洗脱，收集碱洗脱液；

(c)碱洗脱液用酸调PH值到酸性后，上大孔吸附树脂柱，先用5-40％低级醇水溶液洗脱除杂质，再用50-95％低级醇水溶液或无水低级醇洗脱，收集洗脱液，减压回收洗脱液至干，得干粉A；

(d)取干粉A，加丙酮2-40倍量溶解，过滤，回收滤液至干，得干粉B；取干粉B，加乙酸乙酯2-40倍量溶解，过滤，回收滤液至干，得干粉C；

(e)取干粉C，用水、含水或无水甲醇、含水或无水乙醇溶解，上SephadexLH-20柱或反相硅胶柱(Rp-2，Rp-8，Rp-18)，用水、含水或无水甲醇、含水或无水乙醇洗色谱柱，根据TLC合并洗脱液，回收洗脱液至干，得干粉D(丹酚酸B含量大于或等于98％)。

其中：步骤(a)中，浸渍丹参的酸水是盐酸或硫酸的水溶液，加入酸水量是丹参重量的2-50倍(最佳为10-20倍)，浸渍1-40次(最佳为10-20次)，每次1-48小时(最佳为6-10小时)，酸水PH值小于2(最佳为PH值小于1.5)。

步骤(b)中，用1-50％(最佳为2-20％)甲醇或乙醇水溶液洗聚酰胺柱除杂质，用0.005-3％(最佳为0.005-0.5％)碳酸氢钠、碳酸钠或氢氧化钠水溶液洗脱。聚酰胺为聚己内酰胺(尼龙-6)。

步骤(c)中，碱洗脱液用盐酸或硫酸调PH值小于4(最佳为PH值小于2)，先用10-20％甲醇或乙醇水溶液洗脱除杂质，再用甲醇或95％乙醇洗脱。大孔吸附树脂为苯乙烯型。

步骤(d)中，取干粉A，加丙酮10-20倍量溶解，取干粉B，加乙酸乙酯10-20倍量溶解。

步骤(e)中，用5-95％(最佳为20-60％)甲醇或乙醇水溶液溶解干粉C，上色谱柱，用5-95％(最佳为20-60％)甲醇或乙醇水溶液洗色谱柱。

依本发明的方法制成的丹酚酸B，其纯度大于或等于98％(中检所标准品标定)，可用于治疗冠心病、心绞痛、脑血栓、慢乙肝肝纤维化、老年痴呆症、动脉粥样硬化、肿瘤等；可制成任何一种药剂学上所说的剂型，也可配合其它药物或组分一起制成制剂使用。

本发明的优势与特点

1、成本低，环境污染小，易于工业化生产

(1)首选浸渍法和渗漉法提取，不消耗能源