[发明专利]格尔德霉素的新衍生物Gdm-CT-1-1及其制备方法无效
申请号: | 200710166342.0 | 申请日: | 2007-11-07 |
公开(公告)号: | CN101239948A | 公开(公告)日: | 2008-08-13 |
发明(设计)人: | 王以光;邵荣光;赫卫清;李永海 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院医药生物技术研究所 |
主分类号: | C07D225/06 | 分类号: | C07D225/06;C12P17/10;C12R1/55 |
代理公司: | 北京华科联合专利事务所 | 代理人: | 杨厚;王为 |
地址: | 1000*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 格尔德 霉素 衍生物 gdm ct 及其 制备 方法 | ||
1、一种格尔德霉素的新衍生物Gdm-CT-1-1,其结构如式(1)所示。
2、制备权利要求1所述新衍生物Gdm-CT-1-1的方法,具体包括以下步骤:
A.Gdm生物合成阻断变株的构建;
B.Gdm生物合成阻断变株的发酵及Gdm-CT-1-1的提取和纯化。
3、如权利要求2所述的方法,其特征是,所说阻断变株的构建,是根据gdmN基因序列(Genbank DQ914285)设计引物,以吸水链霉菌17997基因组为模板,进行PCR,分别获得与gdmN基因同源的两个片段,在其中间以相应的酶切位点插入选择性标记基因,并与可转入吸水链霉菌17997的质粒载体进行连接,转化大肠杆菌DH5α,获得用于目的基因阻断的重组载体;将重组载体导入吸水链霉菌中;根据选择性标记筛选转化子;利用PCR方法鉴定确认gdmN基因序列插入了选择性标记基因,使gdmN基因遭到破坏,从而获得Gdm生物合成阻断变株CT-1-1。
4、如权利要求2所述的方法,其特征是,新衍生物Gdm-CT-1-1的制备是将CT-1变株直接进行发酵培养,用等量乙酸己酯萃取发酵液上清,乙酸己酯萃取液经薄膜浓缩获得粗品,在硅胶柱上用二氯甲烷洗脱,分部收集,以TLC或HPLC进行检测,再经制备型HPLC得到格尔德霉素新衍生物Gdm-CT-1-1纯品。
5、格尔德霉素新衍生物Gdm-CT-1-1作为先导化合物在开发制备有效药物中的应用。
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