[发明专利]用于催化柠檬醛生成香茅醛的基因工程菌及其构建方法无效

申请号：	200710171560.3	申请日：	2007-11-30
公开（公告）号：	CN101186924A	公开（公告）日：	2008-05-28
发明（设计）人：	魏东芝;杨雪鹏;殷波;魏国栋;马昱澍	申请（专利权）人：	华东理工大学
主分类号：	C12N15/63	分类号：	C12N15/63;C12N15/53;C12N15/66;C12N1/21;C12N9/04;C12P7/24
代理公司：	上海智信专利代理有限公司	代理人：	缪利明
地址：	200237***	国省代码：	上海;31
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摘要：
搜索关键词：	用于催化柠檬生成香茅基因工程及其构建方法
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【权利要求书】：

1.一种NADH氧化酶的重组表达质粒，其特征在于，所述重组表达质粒是在一合适的载体上克隆有NADH氧化酶基因gye。

2.如权利要求1所述的重组表达质粒，其特征在于，所述NADH氧化酶基因gye来源于以下菌中的任一种：氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)、大肠杆菌(Escherichia coli)、志贺菌(Shigella)、沙门氏菌(Salmonella)、醋杆菌(Acetobacter)、克雷伯氏菌(Gluconobacter)。

3.如权利要求2所述的重组表达质粒，其特征在于，所述NADH氧化酶基因gye具有SEQ ID NO：1所示的序列。

4.如权利要求1所述的重组表达质粒，其特征在于，所述载体为pET系列表达载体。

5.如权利要求1-4中任一项所述的重组表达质粒的构建方法，其特征在于包括以下步骤：

A、扩增编码NADH氧化酶的基因gye的序列；

B、将扩增获得的NADH氧化酶基因gye序列经酶切后，连入经相同酶切的pET系列表达载体中，获得NADH氧化酶的重组表达载体。

6.一种基因工程菌，其特征在于，该基因工程菌转化有权利要求1-5中任一项所述的重组表达质粒。

7.如权利要求6所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为大肠杆菌BL21。

8.如权利要求6-7中任一项所述的基因工程菌的构建方法，其特征在于，包括将权利要求1-5中任一项所述的重组表达质粒转入宿主菌，获得表达NADH氧化酶的基因工程菌。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述宿主菌为大肠杆菌BL21。

10.一种生物催化柠檬醛生成香茅醛的方法，其特征在于包括以下步骤：

A、对权利要求12-14中任一项所述的基因工程菌进行发酵以表达NADH氧化酶；

B、向发酵液中加入底物柠檬醛，通过NADH氧化酶催化加氢获得香茅醛。