[发明专利]猪异柠檬酸脱氢酶基因IDH3γ作为猪生产性状的遗传标记及应用无效
申请号: | 200710175639.3 | 申请日: | 2007-10-09 |
公开(公告)号: | CN101157955A | 公开(公告)日: | 2008-04-09 |
发明(设计)人: | 熊远著;任竹青;雷明刚;左波 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人: | 张红兵 |
地址: | 430070湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 柠檬酸 脱氢酶 基因 idh3 作为 生产 性状 遗传 标记 应用 | ||
1.一种猪异柠檬酸脱氢酶基因IDH3γ,它的cDNA序列如序列表SEQ ID NO:1所述,序列长度为1346bp,包含1179bp的开发阅读框,36bp 5’非翻译区和131bp的3’非翻译区。
2.根据权利要求1所述的基因IDH3γ,它的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6所述,其中包含IDH3γ第2内含子序列。
3.根据权利要求1所述的基因IDH3γ,扩增该基因的cDNA序列的引物如下所示:
5’RACE正向引物:5’-AACGCAGAGTACGCGGG-3’;
5’RACE反向引物:5’-TCCTCCGTCGGCCAAGTA-3’;
3’RACE正向引物:5’-CAGAGTACTTTTTTTTTTTTTTTT-3’;
3’RACE反向引物:5-’CGGCAGGTTGTGGTTTGTT-3’。
4.根据权利要求2所述的基因IDH3γ,扩增该DNA片段的引物序列如下所示:
正向引物:5’-GTTCTAGGTGCCCACGAG-3’;
反向引物:5’-TTGACATGCAGCATGAGC-3’。
5.根据权利要求2所述的基因IDH3γ,其特征在于,序列表SEQ ID NO:3第133-172bp处,SEQ ID NO:4第133-172bp处,SEQ ID NO:5第133-164bp处,SEQ ID NO:6第133-164bp处存在以二核苷酸“GT”为重复单位的微卫星多态。
6.一种筛选猪生产性状遗传标记的方法,按照以下步骤:
根据人、鼠IDH3γ基因cDNA同源序列设计引物在猪cDNA中扩增,获得猪IDH3γ基因的cDNA序列;再从猪血液中提取基因组DNA,根据该基因cDNA序列设计引物,PCR扩增,PCR产物纯化和克隆测序,获得如序列表SEQ ID NO:3-6所示的序列;用该DNA序列设计引物在猪基因组DNA中进行PCR扩增,PCR产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染检测。
7.权利要求1或2所述的猪异柠檬酸脱氢酶基因IDH3γ在猪标记辅助选择中的应用。
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