[发明专利]猪异柠檬酸脱氢酶基因IDH3γ作为猪生产性状的遗传标记及应用无效

专利信息
申请号: 200710175639.3 申请日: 2007-10-09
公开(公告)号: CN101157955A 公开(公告)日: 2008-04-09
发明(设计)人: 熊远著;任竹青;雷明刚;左波 申请(专利权)人: 华中农业大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 代理人: 张红兵
地址: 430070湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 柠檬酸 脱氢酶 基因 idh3 作为 生产 性状 遗传 标记 应用
【权利要求书】:

1.一种猪异柠檬酸脱氢酶基因IDH3γ,它的cDNA序列如序列表SEQ ID NO:1所述,序列长度为1346bp,包含1179bp的开发阅读框,36bp 5’非翻译区和131bp的3’非翻译区。

2.根据权利要求1所述的基因IDH3γ,它的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6所述,其中包含IDH3γ第2内含子序列。

3.根据权利要求1所述的基因IDH3γ,扩增该基因的cDNA序列的引物如下所示:

5’RACE正向引物:5’-AACGCAGAGTACGCGGG-3’;

5’RACE反向引物:5’-TCCTCCGTCGGCCAAGTA-3’;

3’RACE正向引物:5’-CAGAGTACTTTTTTTTTTTTTTTT-3’;

3’RACE反向引物:5-’CGGCAGGTTGTGGTTTGTT-3’。

4.根据权利要求2所述的基因IDH3γ,扩增该DNA片段的引物序列如下所示:

正向引物:5’-GTTCTAGGTGCCCACGAG-3’;

反向引物:5’-TTGACATGCAGCATGAGC-3’。

5.根据权利要求2所述的基因IDH3γ,其特征在于,序列表SEQ ID NO:3第133-172bp处,SEQ ID NO:4第133-172bp处,SEQ ID NO:5第133-164bp处,SEQ ID NO:6第133-164bp处存在以二核苷酸“GT”为重复单位的微卫星多态。

6.一种筛选猪生产性状遗传标记的方法,按照以下步骤:

根据人、鼠IDH3γ基因cDNA同源序列设计引物在猪cDNA中扩增,获得猪IDH3γ基因的cDNA序列;再从猪血液中提取基因组DNA,根据该基因cDNA序列设计引物,PCR扩增,PCR产物纯化和克隆测序,获得如序列表SEQ ID NO:3-6所示的序列;用该DNA序列设计引物在猪基因组DNA中进行PCR扩增,PCR产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染检测。

7.权利要求1或2所述的猪异柠檬酸脱氢酶基因IDH3γ在猪标记辅助选择中的应用。

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