[发明专利]T型非病毒载体及包含其的复合药物

权利要求书

1.一种非病毒载体TNFαm2-SON2-GRP，其自N端至C端依次为TNFαm2、SON2和GRP：

TNFαm2为肿瘤坏死因子α(TNFα)经突变成强效低毒的衍生物，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其相应的DNA编码序列如SEQ ID NO.2所示；

SON2为富含碱性氨基酸与核定位序列且能够同带负电荷的毒素基因重组体相结合的多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，其相应的DNA编码序列如SEQ ID NO.5所示；

GRP为能够同其受体GRPR相结合的受体配体多肽胃泌素释放肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示，其相应的DNA编码序列如SEQ ID NO.7所示。

2.如权利要求1所述的非病毒载体TNFαm2-SON2-GRP，其从N端至C端的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。

3.编码如权利要求1或2所述的非病毒载体TNFαm2-SON2-GRP的融合基因TNFαm2-SON2-GRP，其DNA序列如SEQ ID NO.9所示。

4.包含权利要求3所述的融合基因的表达型重组体。

5.如权利要求4所述的表达型重组体，其是将融合基因TNFαm2-SON2-GRP插入到质粒载体pCW111的PL-SD的下游，成为包含PL-SD-TNFαm2-SON2-GRP的表达型重组体pCW-TSG，pCW111的序列如SEQ ID NO.14所示。

6.由权利要求4或5所述的表达型重组体转化、转染或转导宿主得到的细胞。

7.生产权利要求1-2任一项的非病毒载体TNFαm2-SON2-GRP的方法，包括在合适表达的条件下培养权利要求6所述的细胞，并分离和纯化由所述细胞表达的所述非病毒载体TNFαm2-SON2-GRP。 

8.一种用于靶向性肿瘤基因治疗的复合药物，所述复合药物是包含权利要求1-2任一项的非病毒载体TNFαm2-SON2-GRP以及一种表达型DNA重组体的复合物，所述表达型DNA重组体包含一种表达对细胞具有杀伤能力的蛋白质的编码基因，该编码基因为绿脓杆菌外毒素第三功能结构域突变体PEIIImut，其DNA编码序列如SEQ ID NO.11所示，编码的氨基酸序列如SEQID NO.10所示。

9.如权利要求8所述的复合药物，其中所述表达型DNA重组体为应用pGL3载体构建的受NF-κB和肿瘤特异性启动子SCP(survivin core promoter)双重控制的表达型重组体5×NFBS-SCP-PEIIImut；其中5×NFBS为包含5个重复克隆的NF-κB结合位点及其旁侧序列的DNA片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；其中肿瘤特异性启动子SCP的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。

10.如权利要求8或9所述的复合药物在制备用于治疗NF-κB⁺SCP⁺GRP受体阳性的恶性肿瘤的药物中的用途。

11.如权利要求1或2所述的非病毒载体TNFαm2-SON2-GRP在制备用于治疗GRP受体阳性的恶性肿瘤的药物中的用途。