[发明专利]一种丹参丹酚酸B的制备方法和检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种丹参丹酚酸B的制备方法和检测分 析方法，进一步涉及一种含量大于等于90％的丹参丹酚酸B的制备方法和检测分 析方法。

背景技术

丹参中含有的成分包括：多糖、蛋白质和鞣质等无效成分，水溶性和脂溶性 等有效成分，有效成份中脂溶性成分主要有丹参酮类和罗列酮类，丹参酮类化合 物多属于二萜化合物，其中大部分是二萜醌类化合物，丹参的水溶性成分均具有 酚酸性结构，统称为丹酚酸，包括丹参素、丹酚酸A、B、C、D、E、H、I、J、 异丹酚酸C、迷迭香酸、紫草酸等，丹酚酸多数是由丹参素[D-(+)-β-(3，4-二 羟基苯基)乳酸]与咖啡酸、其衍生物或二聚体缩合而成。丹参丹酚酸B是丹参水 溶性有效成分之一，又称为丹参酸B，也属于酚酸类化合物，是由3分子的丹参素 和1分子咖啡酸缩合而成。丹酚酸B作为丹参中的主要水溶性成分，在治疗心血 管疾病、慢性肝炎、抗肝纤维化、抗动脉粥样硬化和改善记忆功能障碍等方面发 挥着重要作用。因此，从丹参药材得到丹参丹酚酸B工艺，一直是很多医药科研 人员想要解决的事情，主要原因：(1)丹参的成分复杂，含有大量的无效成分， 纯化工艺中无效成分对丹参丹酚酸B具有很大的裹协作用，导致丹酚酸B提取率 降低；(2)现有技术中采用的检测分析方法中，没有采用科学的方法，将与丹参 丹酚酸B性质相近的物质分离开，导致高效液相色谱中，丹酚酸B峰与很多成分 重叠，没有达到很好的纯度；(3)丹酚酸B为三分子丹参素与一分子咖啡酸缩合 而成，其他丹酚酸也有类似结构，丹酚酸类化合物含有多个酚羟基、酯键以及羟 基，这些结构在受热情况下容易发生分解、氧化以及脱羧、脱羟基等反应，给提 取分离带来一定的困难，丹酚酸类成分结构、性质相近，对其纯化分离具有一定 的难度。

综上所述，若将丹参丹酚酸B开发成成药制剂，必须采用科学的分析技术为 标准，开发出一种适合工业化生产，收率好、纯度高的生产工艺，得到丹参丹酚 酸B作为物质基础。

文献“高纯度丹酚酸B的制备工艺研究(时珍国医国药2005年第16卷第六 期，476-478，王凤美等)”采用水提取、乙酸乙酯萃取、大孔树脂纯化的方法， 得到91.8％的丹参丹酚酸B；文献“大孔树脂分离丹参酚酸B的筛选研究(时珍 国医国药2006年第17卷第6期，973-974，叶勇)”，采用醇提、大孔吸附树脂 的方法，得到丹参丹酚酸B；上述文献采用的分析方法是：等度流动相的检测分析 方法，这种分析方法的科学性有待商榷，其丹参丹酚酸B的含量不是真正物质的 含量，并且上述方提取率不高，需要进一步研究；中国专利CN1488627A“丹酚酸 B镁盐的制备方法”采用乙醇提取、大孔吸附树脂法、聚酰胺层析法，得到含量大 于90％的丹参丹酚酸B，该方法虽然在能够得到一定含量的丹参丹酚酸B，但其 含量的检测方法没有明确，结果可信度有待研究。

发明内容

基于上述原因，我们的科研人员通过创造性的劳动，对丹参的成分进行深入的 研究，发现将乙醇提取法、大孔吸附树脂法、聚酰胺层析法、有机溶剂萃取法进 行有机的结合，形成整体的提取纯化丹参中丹酚酸B的工艺方法，该方法的提取 率可以达到2％以上，丹参丹酚酸B采用梯度流动相洗脱的检测方法含量大于90 ％，充分说明本发明的工艺方法具有很好的现实意义。

本发明通过以下技术方案实现的。

一种丹参丹酚酸B的制备方法：丹参药材乙醇提取后，经大孔吸附树脂法、 聚酰胺吸附树脂法和有机溶剂萃取法，得到丹参丹酚酸B。

其中方法为：

取丹参药材，乙醇提取，滤过，合并滤液，浓缩，离心，取上清液过非极性 或弱极性大孔吸附树脂柱，水洗弃去，10-20％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至 乙醇至尽，离心，取上清液过聚酰胺吸附树脂柱，水洗弃去，30％-50％乙醇洗 脱，弃去洗脱液，50％-70％乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩至乙醇至尽，浓缩液调 节PH值1-4，用有机溶剂萃取，有机相浓缩，真空干燥，即得。

其中大孔树脂柱为HPD-100、HPD-100A、HPD-300、HPD-400、HPD-400A、 HPD-450、D101、1300-I、1400或AB-8。

其中有机溶剂为乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、正丁醇、异丙醇中的一种。