[发明专利]兔源IgG核酸适配子及其制备方法和应用

权利要求书

1. 一种兔源IgG核酸适配子，其特征在于它是具有序列表中SEQID No.1～SEQ ID No.9的核苷酸序列之一。

2. 根据权利要求1所说的一种兔源IgG核酸适配子，其特征在于所说的SEQ ID No.1～SEQ ID No.9所述的核苷酸序列具有下述结构之一：

3. 根据权利要求1所说的一种兔源IgG核酸适配子，其特征在于所说的核苷酸序列也可以与SEQ ID No.1～SEQ ID No.9中的一种兔源IgG核酸适配子的核苷酸序列之一同源序列占60％以上，使其具有相同功能。

4. 根据权利要求1所说的一种兔源IgG核酸适配子，其特征在于所说的核苷酸序列也可以与SEQ ID No.1～SEQ ID No.9中的一种兔源IgG核酸适配子的核苷酸序列之一杂交的寡核苷酸序列，使其具有相同功能。

5. 根据权利要求1所说的一种兔源IgG核酸适配子，其特征在于所说的核苷酸序列也可以用SEQ ID No.1～SEQ ID No.9中的一种兔源IgG核酸适配子的核苷酸序列之一转录的RNA序列。

6. 根据权利要求1所说的一种兔源IgG核酸适配子，其特征在于所说的核苷酸序列的不少于一个位置的A或G或C或T或U被稀有碱基甲基化嘌呤或二氢尿嘧啶或次黄嘌呤置换后，使其具有相同功能。

7. 根据权利要求1所说的一种兔源IgG核酸适配子，其特征在于所说的核苷酸序列的不少于一个位置进行磷酸化或甲基化或氨基化或巯基化或同位素化或结合生物素或结合地高辛或结合荧光物质或结合纳米发光材料或酶标记修饰，使其具有相同功能。

8. 一种兔源IgG核酸适配子的筛选制备方法，其特征在于，它是由以下步骤构成：

(1)用PCR制备ssDNA文库

文库扩增方案一：

采用对称PCR扩增得到5’端带有生物素的dsDNA文库，后者以链亲和素磁珠为基质进行分离并变性解链，磁分离后经乙醇沉淀得到后续筛选的ssDNA文库。

文库扩增方案二：

采用不对称PCR，获得ssDNA文库。

(2)反筛与筛选

以Protein A-琼脂糖为基质，反筛去掉ssDNA文库中的非特异结合部分，筛选得到与兔源IgG特异结合的ssDNA；

(3)克隆及阳性克隆的序列测定

扩增数轮筛选后所得次级文库，回收目标片段，经连接、转化，挑取单克隆白斑，对PCR反应鉴定的阳性克隆进行序列测定。

9. 一种上述兔源IgG核酸适配子的应用，其特征在于在实验室、临床及工业化的应用，包括用于兔源IgG的检测、兔源IgG的分离纯化。

10. 根据权利要求9所说的一种兔源IgG核酸适配子的应用，其特征在于所说的具有序列表中SEQ ID No.10～SEQ ID No.18所述的核苷酸序列之一，用于实验室、临床及工业化，包括兔源IgG检测和/或兔源IgG的分离纯化。