[发明专利]异柠檬酸测定试剂盒及异柠檬酸的浓度测定方法

权利要求书

1.一种酶循环扩增法、酶比色法及酶联法的异柠檬酸的浓度测定方法，其方法原理如下：

D-异柠檬酸+辅酶 异柠檬酸脱氢酶 二氧化碳+

                            酮戊二酸+还原型辅酶

二氧化碳+亚铁细胞色素 甲酸脱氢酶 甲酸+

                                    高铁细胞色素

甲酸+辅酶 甲酸脱氢酶 二氧化碳+还原型辅酶

将最终反应物置于紫外/可见光分析仪或半、全自动生化分析仪下，检测主波长340nm吸光度上升的速度，测算出异柠檬酸的浓度大小测定结果。

2.一种异柠檬酸测定试剂盒，主要成分包括：

缓冲液                20——500mmol/L

稳定剂                1——4000mmol/L

辅酶                  1——6mmol/L

异柠檬酸脱氢酶        1000——80000U/L

甲酸脱氢酶            1000——80000U/L

辅酶依赖型甲酸脱氢酶  1000——80000U/L

亚铁细胞色素          1——50mmol/L

试剂成分的浓度不一定只限于上述范围；在此范围内效果较好，在此范围外，试剂仍会反应作用。

其特征在于：试剂盒可以是干粉状态，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液体试剂，直接使用。

3.根据权利要求2所述异柠檬酸测定试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、辅酶、异柠檬酸脱氢酶、甲酸脱氢酶、辅酶依赖型甲酸脱氢酶、亚铁细胞色素组成单剂试剂。

4.根据权利要求2所述异柠檬酸测定试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、辅酶、异柠檬酸脱氢酶、甲酸脱氢酶、辅酶依赖型甲酸脱氢酶、亚铁细胞色素组成双剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、辅酶、亚铁细胞色素组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、异柠檬酸脱氢酶、甲酸脱氢酶、辅酶依赖型甲酸脱氢酶组成。辅酶、异柠檬酸脱氢酶、甲酸脱氢酶、辅酶依赖型甲酸脱氢酶、亚铁细胞色素在试剂1或试剂2中的位置可以不限。

5.根据权利要求2所述异柠檬酸测定试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、辅酶、异柠檬酸脱氢酶、甲酸脱氢酶、辅酶依赖型甲酸脱氢酶、亚铁细胞色素组成多剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、辅酶、亚铁细胞色素组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、甲酸脱氢酶、辅酶依赖型甲酸脱氢酶组成；试剂3，由缓冲液、稳定剂、异柠檬酸脱氢酶组成。辅酶、异柠檬酸脱氢酶、甲酸脱氢酶、辅酶依赖型甲酸脱氢酶、亚铁细胞色素在试剂1、试剂2或试剂3中的位置可以不限。

6.根据权利要求2所述异柠檬酸测定试剂盒，其特征在于：还包括稳定剂1—4000mmol/L或0.1％-100％体积比。所述稳定剂为：硫酸铵(Ammonia Sulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene Glycol)、乙二醇(Ethylene glycol)及防腐剂中的至少一种。