[发明专利]一种消栓滴丸质量标准及检验方法

权利要求书

1.一种消栓滴丸质量标准及检验方法，其特征在于：该方法中的质量标准a鉴别及b含量测定方法是以下方法的一种或几种：

a鉴别：

黄芪的鉴别包括下列步骤：取消栓滴丸3～10g，研细，加水30～90ml，超声处理15～60分钟使溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，加水饱和的正丁醇或三氯甲烷、乙醚、石油醚20～50ml，振摇提取，分取正丁醇或三氯甲烷、乙醚、石油醚液，蒸干，残渣加甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮2～5ml使溶解，置中性氧化铝柱100～120目，3～6g，内径1～1.5cm上，用30～50％甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮40～60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮0.5～1.5ml使溶解，作为供试品溶液：另取黄芪甲苷对照品，加甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；用薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2～20μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水10～15∶5～8∶1.5～3为展开剂，置用展开剂预饱和15～30分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以5～20％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯365nm下检视，显相同颜色的荧光斑点；

赤芍的鉴别包括下列步骤：照高效液相色谱法中国药典2005年版一部附录VID，色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％磷酸水溶液10～20∶90～80为流动相；检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加40～60％甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮制成每1ml含30～50μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取消栓滴丸研细，取约1～3g，精密称定，置25～50ml量瓶中，加60～80％甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮30～50ml，超声处理20～60分钟使溶解，放至室温，加60～80％甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮至刻度，摇匀，静置，精密量取上清液15～35ml，通过中性氧化铝柱100～200目，1.5～3g，内径1～1.5cm，40～60％甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮湿法装柱，收集至25～50ml量瓶中，再用40～60％甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮洗脱，收集洗脱液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～20μl，注入液相色谱仪，测定，供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰；

地龙的鉴别包括下列步骤：取消栓滴丸5～15g，加硅藻土3～7g，研匀，加甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮30～70ml，加热回流2～3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40～60ml，超声处理20～60分钟使溶解，用乙酸乙酯-甲酸9.5～12.5∶0.5～0.7提取2～3次，每次20～30ml，合并乙酸乙酯-甲酸液，蒸干，残渣加甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮0.5～1.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取地龙对照药材2～3g，加三氯甲烷或甲醇、乙醇、丙酮20～40ml，超声处理20～60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮0.5～1.5ml使溶解，作为对照药材溶液；用薄层色谱法验，吸取上述两种溶液各5～20μl，分别点于同一硅胶薄层板上，以异辛烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸5～15∶3～9∶2～6∶0.1～0.3为展开剂，置用展开剂预饱和15～30分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点；

b含量测定：

芍药苷的含量测定方法包括下列步骤：

照高效液相色谱法测定，色谱条件与系统适用性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.1％磷酸水溶液10～20∶90～80为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加40～60％甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮制成每1ml含30～50μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取消栓滴丸研细，取约1～3g，精密称定，置25～50ml量瓶中，加60～80％甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮30～50ml，超声处理20～60分钟使溶解，放至室温，加60～80％甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮至刻度，摇匀，静置，精密量取上清液15～35ml，通过中性氧化铝柱100～200目，1.5～3g，内径1～1.5cm，40～60％甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮湿法装柱，收集至25～50ml量瓶中，再用40～60％甲醇或三氯甲烷、乙醇、丙酮洗脱，收集洗脱液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

消栓滴丸每克含芍药苷不得少于1.30mg。

2.根据权利要求1所述的一种消栓滴丸质量标准及检验方法，其特征在于：该方法中的质量标准a鉴别及b含量测定方法是以下方法的一种或几种：

a鉴别：

黄芪的鉴别：取消栓滴丸5g，研细，加水60ml，超声处理30分钟使溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，加水饱和的正丁醇30ml，振摇提取，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，置中性氧化铝柱100～120目，5g，内径1～1.5cm上，用40％甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法中国药典2005年版一部附录VIB试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水13∶7∶2为展开剂，置用展开剂预饱和15分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯365nm下检视，显相同颜色的荧光斑点；

赤芍的鉴别：照高效液相色谱法中国药典2005年版一部附录VID，色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％磷酸水溶液15∶85为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加50％甲醇制成每1ml含35μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取消栓滴丸研细，取约2.0g，精密称定，置50ml量瓶中，加70％甲醇40ml，超声处理30分钟使溶解，放至室温，加70％甲醇至刻度，摇匀，静置，精密量取上清液25ml，通过中性氧化铝柱100～200目，2g，内径1～1.5cm，50％甲醇湿法装柱，收集至50ml量瓶中，再用50％甲醇洗脱，收集洗脱液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰；

地龙的鉴别取消栓滴丸10g，加硅藻土5g，研匀，加甲醇50ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水50ml，超声处理30分钟使溶解，用乙酸乙酯-甲酸9.5∶0.5提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取地龙对照药材2g，加三氯甲烷20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法中国药典2005年版一部附录VIB试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，使成条状，以异辛烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸5∶3∶2∶0.1为展开剂，置用展开剂预饱和15分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点；

b含量测定：芍药苷含量测定

照高效液相色谱法中国药典2005年版一部附录VID测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.1％磷酸水溶液15∶85为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加50％甲醇制成每1ml含35μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备取消栓滴丸研细，取约2.0g，精密称定，置50ml量瓶中，加70％甲醇40ml，超声处理30分钟使溶解，放至室温，加70％甲醇至刻度，摇匀，静置，精密量取上清液25ml，通过中性氧化铝柱100～200目，2g，内径1～1.5cm，50％甲醇湿法装柱，收集至50ml量瓶中，再用50％甲醇洗脱，收集洗脱液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

消栓滴丸每克含芍药苷不得少于1.30mg。