[发明专利]聚乙二醇类聚合物修饰的睫状神经营养因子及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物领域，具体的说，涉及聚乙二醇类聚合物修饰的睫状神经营养因子及其制备方法。

背景技术

睫状神经营养因子(Ciliary neurotrophic factor，CNTF)最初在鸡胚眼球脉络膜、睫状体和虹膜中被发现，因能促进体外培养的鸡胚副交感睫状节神经元存活而命名。CNTF是约200个氨基酸组成的多肽激素，由成熟个体外周神经中的施旺细胞、星形细胞中的一些亚细胞群体和中枢神经系统分泌的胞液分子而非由靶组织分泌。CNTF最初被认为是睫状神经节副交感神经元培养时的营养因子，并由此命名。它可以促进多种神经细胞和神经胶质细胞的生长与分化，包括运动神经元、感觉神经元、交感神经元、海马神经元和少突细胞。

90年代初期，人们将CNTF用于治疗肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)的实验研究。Regeneron的研究者们对一组ALS患者进行临床研究，研究开始不久便发现病人们的体重大大降低。ALS病人反馈资料表明，使用药物组体重比安慰剂组明显降低，且这一结果持续整个研究过程。Regeneron公司根据这一结果决定在肥胖症领域对其进行实验。结果表明，CNTF在体内可与下丘脑的特异性受体结合，激活抑制食欲的关键信号通道，抑制进食欲望且使机体不会产生饥饿感，从而降低体重。动物实验结果显示，CNTF不仅能使肥胖基因有缺陷的肥胖小鼠迅速减肥，而且对因高脂肪饮食造成的肥胖小鼠也有减肥作用(参见Bluher S，Moschos S，Bulen J Jr等人，Ciliaryneurotrophic fac2torAx15 alters energy homeostasis，decreases bodyweight，and improves metabolic control in diet2induced obese andUCP12DTA mice，J.Diabetes，2004，53(11)：第2787-2796页)。

已完成的临床研究表明，CNTF不仅具有与化学药物同水平的疗效，而且解决了化学药物毒副作用大的问题。但是，CNTF也存在着半衰期短，具有一定的免疫原性等特点。因此存在着进一步改善CNTF临床治疗效果的要求。

为了使CNTF的使用更加方便、作用更加持久，更适于长期使用。本发明人考虑用可溶性高分子聚合物对其进行化学修饰，可以有效改变其体内分布和药动学性质。用高分子化学修饰剂对蛋白质和肽类分子进行化学修饰已经成为生物技术与生物医学领域的研究热点。在众多的高分子化学修饰剂中，以线性的、无毒的、无免疫原性的和具有双歧聚合物性质的聚乙二醇对蛋白质的化学修饰最引人注目。用作修饰蛋白的PEG实际上是单甲氧基聚乙二醇，该化合物在水和有机溶剂中具有高溶解性，不挥发，无味，体内应用无免疫原性和抗原性，长期肌肉或皮下注射无不良反应。体内代谢稳定，低的肾脏排除率，具有很高的柔韧性；生物相容性已经得到FDA的认证。

蛋白质被PEG修饰后，偶联的PEG链在蛋白分子表面产生空间位阻效应，减弱了血液中各种水解酶对蛋白的水解作用，从而有效地延长了蛋白在循环系统内的保留时间。由于PEG空间位阻的存在，可阻止药物与蛋白表面的抗原决定簇接触，从而减少被免疫系统清除的几率，降低蛋白质的抗原性和免疫原性。亲水性PEG与蛋白质共价结合后，可使蛋白质颗粒表面形成较厚的水化层，阻止其凝集、沉淀，增加蛋白的稳定性。

国内外对PEG修饰蛋白质类药物的研究主要集中于腺苷脱氨酶、天冬酰胺酶、白介素、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、超氧化物歧化酶、水蛭素、尿激酶、血红蛋白、干扰素、重组人生长激素、促红细胞生成素等。目前，国内外未见高分子化学修饰剂修饰CNTF的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种聚乙二醇类聚合物修饰的睫状神经营养因子。

本发明的目的还在于提供该聚乙二醇类聚合物修饰的睫状神经营养因子的制备方法。