[发明专利]一种指状青霉的根癌农杆菌介导的遗传转化方法无效
申请号: | 200710300260.0 | 申请日: | 2007-12-17 |
公开(公告)号: | CN101182541A | 公开(公告)日: | 2008-05-21 |
发明(设计)人: | 王继业;李红叶;张志芳 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/80 | 分类号: | C12N15/80;C12N15/11;C12R1/80 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 310027浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 青霉 根癌农 杆菌 遗传 转化 方法 | ||
1.一种指状青霉的根癌农杆菌介导的遗传转化方法,包括以下步骤:
(1)将质粒通过热激法转入根癌农杆菌,制得含有载体的根癌农杆菌;
(2)将含有载体的根癌农杆菌与指状青霉混合培养,以抗生素筛选,制得转化子。
2.根据权利要求1所述的遗传转化方法,其特征在于:所述的步骤(1)中的质粒为含潮霉素B抗性基因的质粒pTFCM。
3.根据权利要求1所述的遗传转化方法,其特征在于:所述的步骤(2)中混合培养的培养基为IM固体培养基,培养基中含诱导剂乙酰丁香酮。
4.根据权利要求1所述的遗传转化方法,其特征在于:所述的步骤(2)中的指状青霉为孢子。
5.根据权利要求4所述的遗传转化方法,其特征在于:所述指状青霉孢子浓度为1×104~1×107个/毫升。
6.根据权利要求1所述的遗传转化方法,其特征在于:步骤(2)中所述的抗生素为潮霉素B与头孢霉素和壮观霉素中的至少一种。
7.根据权利要求1所述的遗传转化方法,其特征在于:步骤(2)中的转化子传代培养若干次后,以潮霉素B筛选,制得稳定的转化子。
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