[发明专利]从生物学样品富集靶细胞的方法及除去白细胞的方法

权利要求书

1.一种从生物学样品富集靶细胞的方法，其中所述的生物学样品是体液，所述的靶细胞包括干细胞、胎儿细胞、循环肿瘤细胞、免疫细胞中的至少一种，所述干细胞为骨髓干细胞、成体干细胞、脐血干细胞或皮肤干细胞，该方法包括： 

用基于摩尔渗透压浓度的方式除去红细胞和用免疫亲和层析法除去白细胞； 

其中所述基于摩尔渗透压浓度的方式包括沉淀和裂解红细胞；其中所述沉淀是以500～3000rpm离心1～6分钟以沉淀RBC，在室温将所收集的RBC于RBC裂解缓冲液中轻柔旋转振荡5～20分钟，然后将所获得的溶液以500～3000rpm离心1～10分钟以沉淀未裂解的细胞，所述未裂解的细胞包括白细胞和稀有细胞； 

其中，所述免疫亲和层析法中使用免疫颗粒，免疫颗粒的尺寸为1μm～20μm，免疫颗粒位于亲和层析柱中并结合有靶向白细胞的特异性结合物；所述的特异性结合物为识别在白细胞上表达的抗原的抗体，所述的抗体为抗CD45抗体，所述抗CD45抗体偶联到Affi-Gel10基质上；其中是将含有白细胞的溶液以0.5～8.5ml/min的流速流过亲和层析柱。 

2.如权利要求1所述的方法，其中所述的体液是血液、骨髓、脊髓或手术液。 

3.如权利要求2所述的方法，其中所述的血液是取血当天的新鲜血液。 

4.如权利要求1所述的方法，其中所述免疫亲和层析法中所使用的免疫颗粒的尺寸为5μm～10μm。 

5.如权利要求1或4所述的方法，其中所述免疫亲和层析法中所使用的免疫颗粒具有可再生性。 

6.如权利要求1所述的方法，其中所述CD45抗体为抗CD45单抗。 

7.如权利要求1所述的方法，该方法所获得的靶细胞适于后续分析、操作或应用，所述后续分析、操作或应用为以下之一：流式细胞术、聚合酶链式反应、免疫荧光、免疫细胞化学、图像分析、酶学测定、炎症研究、基因表达谱分析、治疗效力测验、细胞培养和细胞治疗。 

8.如权利要求1所述的方法，该方法还包括除去血浆蛋白。 

9.如权利要求8所述的方法，该方法还包括回收所除去的白细胞和/或所除去的血浆蛋白。