[发明专利]新型磷脂酶D

权利要求书

1.修饰型磷脂酶D，该修饰型磷脂酶D具有合成磷脂酰肌醇的能力，其含有

(A)SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位、191位和385位的氨基酸残基的至少一个氨基酸残基被置换为其它的氨基酸残基所得的氨基酸序列；或

(B)在该(A)的氨基酸序列中，在与位于该187位、191位和385位的氨基酸残基不同位置的至少一个氨基酸残基具有置换、缺失、插入和/或附加，且具有合成磷脂酰肌醇的能力的多肽的氨基酸序列。

2.权利要求1的修饰型磷脂酶D，其中，

上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列中的187位氨基酸残基被置换为选自苯丙氨酸残基、丝氨酸残基、酪氨酸残基、缬氨酸残基、甘氨酸残基、精氨酸残基、组氨酸残基、天冬酰胺残基和亮氨酸残基的一种氨基酸残基置换，和/或

上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基被置换为选自精氨酸残基、苏氨酸残基、异亮氨酸残基、甘氨酸残基、缬氨酸残基、苯丙氨酸残基、亮氨酸残基、天冬氨酸残基、甲硫氨酸残基、色氨酸残基、和丙氨酸残基的一种氨基酸残基，和/或

上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基被置换为选自半胱氨酸残基、色氨酸残基、亮氨酸残基、甲硫氨酸残基、精氨酸残基、谷氨酸残基、丝氨酸残基、苯丙氨酸残基、缬氨酸残基和脯氨酸残基的一种氨基酸残基。

3.权利要求1的修饰型磷脂酶D，该修饰型磷脂酶D选自:

(1)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为苯丙氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为精氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为亮氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(2)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为苯丙氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为苏氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为半胱氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(3)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为苯丙氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为异亮氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为色氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(4)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为苯丙氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为甘氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为酪氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(5)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为苯丙氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为缬氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为亮氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(6)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为苯丙氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为缬氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为酪氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(7)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为色氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为酪氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为甲硫氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(8)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为色氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为酪氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为精氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(9)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为丝氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为酪氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为谷氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(10)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为丝氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为精氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为甲硫氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(11)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为丝氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为苯丙氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为甲硫氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(12)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为酪氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为苯丙氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为酪氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(13)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为酪氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为亮氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为精氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(14)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为酪氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为亮氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为酪氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(15)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为缬氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为酪氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为酪氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(16)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为缬氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为酪氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为谷氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(17)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为甘氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为天冬氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为亮氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(18)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为缬氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为色氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为色氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(19)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为精氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为酪氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为丝氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(20)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为精氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为酪氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为酪氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(21)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为精氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为酪氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为苯丙氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(22)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为组氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为甲硫氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为缬氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(23)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为精氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为精氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为酪氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(24)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为天冬酰胺残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为丙氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为酪氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(25)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为亮氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为丙氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为酪氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(26)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为亮氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为丙氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为苯丙氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(27)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为亮氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为亮氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为酪氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(28)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为色氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为酪氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为脯氨酸残基的修饰型磷脂酶D；

(29)上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的187位氨基酸残基为缬氨酸残基，上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的191位氨基酸残基为酪氨酸残基，且上述SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的385位氨基酸残基为色氨酸残基的修饰型磷脂酶D。