[发明专利]抗体依赖性细胞毒性检测

权利要求书

1.一种检测抗体依赖性细胞毒性(ADCC)的方法，包括：

(a)监测支持靶细胞在检测培养基中生长的非导电基质上的电极之间的阻抗；和

(b)向检测培养基中加入效应细胞和结合靶细胞的一种抗体；

其中加入效应细胞和抗体后，基质上的电极之间的阻抗下降，表明在检测培养基中ADCC功能已经生效；其中加入效应细胞和抗体后，基质上的电极之间的阻抗增高或未改变，能够表明在检测培养基中未发挥ADCC功能。

2.根据权利要求1的方法，包括在有规则的间隔中测量阻抗。

3.根据权利要求2的方法，包括

包括从每次阻抗测量中导出细胞指数(CI)并确定细胞指数是否发生变化，其中使用下面的公式从每次阻抗测量中导出细胞指数，

其中R_b(f)和R_细胞(f)分别是在细胞存在或不存在情况下的频率依赖性电极电阻，N是阻抗检测处的频点数。

4.根据权利要求1到3中任一项的方法，其中使用系统进行该方法。

5.根据权利要求1到4中任一项的方法，其中每15分钟进行阻抗测量。

6.根据权利要求1到4中任一项的方法，其中该方法进一步包括铺板靶细胞。

7.根据权利要求6的方法，其中靶细胞被铺板18到24小时后加入抗体和效应细胞。

8.根据权利要求1到4中任一项的方法，其中靶细胞在基质上是单层的。

9.根据权利要求1到8中任一项的方法，其中靶细胞以2K和100K每孔之间的密度铺板。

10.根据权利要求1到8中任一项的方法，其中靶细胞以15K和25K每孔之间的密度铺板。

11.根据权利要求1到8中任一项的方法，其中靶细胞以大约20K每孔的密度铺板。

12.根据权利要求1到11中任一项的方法，其中效应细胞比靶细胞(E:T)的比例为25:1。

13.根据权利要求1到11中任一项的方法，其中E:T大于10:1。

14.根据权利要求1到11中任一项的方法，其中E:T大于50:1。

15.根据权利要求1到11中任一项的方法，其中E:T大于100:1。

16.根据权利要求1到15中任一项的方法，其中以大约1和大约100μg/ml之间的浓度加入抗体。

17.根据权利要求1到15中任一项的方法，其中以大约1和大约50μg/ml之间的浓度加入抗体。

18.根据权利要求1到15中任一项的方法，其中以大约2和大约8μg/ml之间的浓度加入抗体。

19.根据权利要求1到18中任一项的方法，包括向检测培养基中加入2种或2种以上的结合靶细胞的抗体。

20.根据权利要求1到18中任一项的方法，包括向检测培养基中加入3种或3种以上的结合靶细胞的抗体。

21.根据权利要求1到18中任一项的方法，包括向检测培养基中加入4种或4种以上的结合靶细胞的抗体。

22.根据权利要求1到21中任一项的方法，其中靶细胞表达顶端抗原。

23.根据权利要求22的方法，包括筛选表达顶端抗原的靶细胞的预先步骤。

24.根据权利要求1到23中任一项的方法，其中靶细胞是癌细胞或病毒感染的细胞。

25.根据权利要求24的方法，其中靶细胞是癌细胞。

26.根据权利要求25的方法，其中癌细胞来自于细胞系。

27.根据权利要求26的方法，其中癌细胞是SKBR3细胞或MG63细胞。

28.根据权利要求1到27中任一项的方法，其中效应细胞包括外周血单核细胞(PBMC)、天然杀伤(NK)细胞、单核细胞、细胞毒T淋巴细胞或中性粒细胞。