[发明专利]测定病毒粒子/病毒抗原浓度的方法无效
申请号: | 200780006618.7 | 申请日: | 2007-01-12 |
公开(公告)号: | CN101395477A | 公开(公告)日: | 2009-03-25 |
发明(设计)人: | H·科斯特 | 申请(专利权)人: | 诺华疫苗和诊断公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;C12N7/02 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人: | 陶家蓉 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 测定 病毒 粒子 抗原 浓度 方法 | ||
1.一种测定样品中病毒粒子和/或病毒抗原浓度的方法,该方法包括以下 步骤:
a)在允许病毒粒子和/或病毒抗原与离子交换基质结合的条件下将含有所 述病毒粒子和/或病毒抗原的样品施加于所述离子交换基质,从而将所述病毒粒 子和/或病毒抗原与其他样品组分分离;
b)从所述基质上洗脱所述结合的病毒粒子和/或病毒抗原;和
c)检测所述病毒粒子和/或病毒抗原;
其中,检测信号指示了样品中所述病毒粒子和/或病毒抗原的浓度。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还包括下述步骤:将 所述检测信号与至少一个通过检测含有已知浓度所述病毒粒子和/或病毒抗原 的样品获得的参考值进行比较以确定所述样品中所述病毒粒子和/或病毒抗原 的浓度。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,将所述检测信号与一个以上的 参考值进行比较。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于,所述离子交换基质 是阳离子交换基质。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述阳离子交换基质包含纤维 素基质。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述纤维素基质的凝胶排阻限 为2000-4000道尔顿。
7.如权利要求5或6所述的方法,其特征在于,所述纤维素基质包含硫酸 酯作为活化基团。
8.如权利要求1-7中任一项所述的方法,其特征在于,所述方法用于测定 病毒粒子的浓度。
9.如权利要求1-8中任一项所述的方法,其特征在于,所述病毒是流感病 毒。
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述病毒是选自以下毒株的 流感病毒:A/New Caledonia H1N1、B/Jingsu、A/Wyoming H3N2、A7New York H3N2、B/Malaysia。
11.如权利要求1-10中任一项所述的方法,其特征在于,所述样品是病毒 增殖培养物的等分试样。
12.如权利要求11所述的方法,其特征在于,所述样品衍生自鸡蛋培养物。
13.如权利要求11所述的方法,其特征在于,所述样品衍生自细胞培养物。
14.如权利要求13所述的方法,其特征在于,所述样品衍生自MDCK细 胞培养物。
15.如权利要求1-14中任一项所述的方法,其特征在于,步骤a)中所述病 毒粒子和/或病毒抗原的结合是在低盐条件下进行的。
16.如权利要求15所述的方法,其特征在于,步骤a)中所述病毒粒子和/ 或病毒抗原的接触受含Na2HPO4缓冲液存在的影响。
17.如权利要求16所述的方法,其特征在于,所述缓冲液中Na2HPO4的 浓度为0.01-0.1mol/1。
18.如权利要求1-17中任一项所述的方法,其特征在于,步骤c)中所述病 毒粒子和/或病毒抗原的洗脱是在高盐条件下进行的。
19.如权利要求18所述的方法,其特征在于,步骤c)中所述病毒粒子和/ 或病毒抗原的洗脱受NaCl缓冲液存在的影响。
20.如权利要求19所述的方法,其特征在于,所述缓冲液中NaCl的浓度 为1.0-2.0mol/1。
21.如权利要求1-20中任一项所述的方法,其特征在于,步骤c)中的检测 是通过测量洗脱组分的UV吸光度进行的。
22.如权利要求21所述的方法,其特征在于,所述UV吸光度是在280nm 波长下测量的。
23.离子交换基质在测定样品中病毒粒子和/或病毒抗原浓度中的应用。
24.如权利要求23所述的应用,其特征在于,所述离子交换基质是阳离子 交换基质。
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