[发明专利]大环内酯类免疫抑制剂的水溶性聚乙二醇结合物的制备方法

权利要求书

1.大环内酯类免疫抑制剂的聚乙二醇结合物的制备方法，包括：

(a)将酰化剂在脂肪酶存在下与含莽草酸衍生的环己基区域的大 环内酯类免疫抑制剂起反应，形成酰化的大环内酯；

(b)将酰化的大环内酯在碱存在下与甲氧基聚(乙二醇)衍生物 或硫氢基结尾的聚(乙二醇)衍生物起反应。

2.根据权利要求1的方法，其中大环内酯类免疫抑制剂为一种雷帕 霉素，所述雷帕霉素在42-位被区域特异性酰化。

3.根据权利要求1或2的方法，其中大环内酯类免疫抑制剂结构如 下：

其中：

R¹选自H和烷基、链烯基、芳基、和芳基烷基；

R²选自H、羟基和-O-烷基；

R³为H、烷基、链烯基、芳基、芳基烷基、和-C(O)R³¹；

R³¹选自H、烷基、链烯基、芳基、和芳基烷基；

R⁴选自H、羟基和-O-烷基；

R⁵选自H、羟基烷基、羟基烯基、羟基芳基、羟基芳烷基、和-C(O) R⁵¹；和

R⁵¹选自羟基烷基、羟基烯基、羟基芳基、和羟基芳烷基。

4.根据权利要求1或2的方法，其中大环内酯类免疫抑制剂为42-O- (2-羟基)乙基雷帕霉素。

5.根据权利要求1或2的方法，其中大环内酯类免疫抑制剂为 CCI-779。

6.根据权利要求1的方法，其中大环内酯类免疫抑制剂选自他克莫 司和子囊霉素，所述他克莫司和所述子囊霉素在32-位被区域特异性酰 化。

7.根据权利要求1或6的方法，其中所述大环内酯类免疫抑制剂结 构如下：

其中：

R⁷、R⁸、和R⁹独立地为H或烷基；

R是乙基或烯丙基。

8.选自以下式I、式II、式III、式VI、式V和式VI的聚乙二醇化 大环内酯类免疫抑制剂的制备方法：

其中：

n为10～1000的整数；

X为O或S。

其中所述的方法包括：

(a)将大环内酯在脂肪酶存在下与酰化剂起反应，形成酰化大环 内酯，其中所述酰化剂结构如下：

其中：

R₆为H或甲基；

Y为离去基团；和

(b)将酰化的大环内酯在碱存在下与甲氧基聚(乙二醇)衍生物 起反应，其中所述甲氧基聚(乙二醇)衍生物结构如下：

HX-(CH₂CH₂O)n-CH₃

其中：

n为10～1000的整数；和

X为O或S。

9.根据权利要求1～8任何一项的方法，其中所述脂肪酶是来自微 生物的微生物脂肪酶，所述微生物包括黑曲霉菌、南极假丝酵母、皱褶 假丝酵母、米黑毛霉、洋葱假单胞菌、荧光假单胞菌、或代氏根霉。

10.根据权利要求1～9任何一项的方法，其中所述脂肪酶来自南极 假丝酵母。

11.根据权利要求1～10任何一项的方法，其中所述脂肪酶为固定 的南极假丝酵母B型脂肪酶(优选固定在丙烯酸树脂上)。

12.根据权利要求1～9任何一项的方法，其中所述脂肪酶为来自洋 葱假单胞菌的脂肪酶PS。