[发明专利]大环内酯类免疫抑制剂的水溶性聚乙二醇结合物的制备方法

说明书

发明背景

本发明涉及大环内酯类免疫抑制剂的水溶性聚(乙二醇)结合物的 制备方法，所述大环内酯类免疫抑制剂为西罗莫司(雷帕霉素)、依维 莫司、temsirolimus(CCI-779)、他克莫司(FK506)和子囊霉素(FK520)。

雷帕霉素(1)、他克莫司(FK506，2)和子囊霉素(FK520，3)为 结构相似的大环聚酮化合物，且都是有效的免疫抑制剂，相互作用于相 同的细胞内受体，但有不同的作用方式，彼此在不同阶段抑制T细胞活 化(Rosen等，“Natural products as probes of cellular function：studies of immunophilins”Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1992，31，384-400)。这些 大环内酯具有抗微生物活性，并且在包括实验性变态反应性脑脊髓炎、 关节炎的自身免疫性疾病动物模型，糖尿病动物模型，SLE的MRL/lpr 小鼠模型，过度增生性皮肤疾病和葡萄膜视网膜炎中也均有效。

¹雷帕霉素          2他克莫司(FK506)R＝CH₂CH＝CH₂

                   3子囊霉素(FK520)R＝CH₂CH₃

雷帕霉素和他克莫司已被批准用于防止移植排斥反应。但是，这两 种化合物由于它们非常有限的水溶性在按配方制造组合物时存在类似 的问题。例如，他克莫司在水中的溶解度为12μg/mL。如此低的溶解度 要求相当复杂的制剂。举例来说，需要200mg/mL氢化聚氧乙烯 (polyoxy)60蓖麻油(HCO-60)和80％(v/v)无水酒精作为增溶剂， 以帮助5mg他克莫司溶解形成静脉注射剂。雷帕霉素在水中的溶解度 约为2.6μg/mL且具有低的口服生物利用度(<15％)(Yatscoff等， “Rapamycin：distribution，pharmacokinetics，and therapeutic range investigations”Ther.Drug Monit.1995，17，666-671)。尽管雷帕霉素 也是一种有效的肿瘤生长抑制剂，对多种实体肿瘤通常具有IC₅₀<5O nm，但这些特性限制了雷帕霉素除低剂量治疗如免疫抑制以外的临床应 用。

聚乙二醇(PEG)和甲氧基聚乙二醇(mPEG)是可用的线性或分 支的中性聚合物，具有不同的分子量和低多分散性(Mw/Mn<1.05)。 已发现这些水/有机溶剂可溶的无毒聚合物有用于生物和制药应用。一个 这样的应用是将这些聚合物与非或低水溶性的小分子治疗剂结合，制得 水溶性PEG-药物结合物，这称为聚乙二醇化。据报道有机分子的聚乙 二醇化可提高有机分子的水溶性，并赋予其他有益的性能如改善血浆半 衰期、改善生物分布和降低毒性(Greenwald等，“Effective drug delivery by PEGylated drug conjugates”，Advanced Drug Delivery Rev.2003，55， 217-250；Pasut等，“Protein，peptide and non-peptide drug PEGylation for therapeutic，application”，Expert Opin.Ther.Patents 2004，14，859-894)。

美国专利申请出版号US-2005/0234234中论述了脂肪酶催化乙酰化 的雷帕霉素。这种酶方法在温和条件下从雷帕霉素区域特异地 (regiospeciflcally)得到雷帕霉素42-酯衍生物，且具有优良产率。在此 引入所述美国专利申请出版物，作为参考。