[发明专利]提取RNA的方法

权利要求书

1.从含有至少一个细胞或病毒的生物样品中提取核糖核酸的方法，其包括：

a)使所述样品与酸性溶液接触以形成混合物；

b)将所述混合物与选定的具有在不首先进行任何预裂解情况下从生物样品中直接释放核糖核酸之能力的固相结合材料合并，其中不使用离液剂或去污剂来实现裂解，由此所述固相结合材料引起细胞和病毒的裂解以释放核糖核酸；和

c)将核糖核酸结合到所述固相上。

2.权利要求1的方法，其还包括：

d)将所述样品与在其上结合了核糖核酸的所述固相相分离；

e)任选地用至少一种清洗溶液清洗所述固相；和

f)通过将所述固相材料与释放所结合RNA进入溶液的试剂相接触来从所述固相上洗脱所结合的核糖核酸。

3.权利要求1的方法，其中形成所述样品与所述酸性溶液的混合物的步骤与将所述混合物与所述固相合并的步骤同时进行。

4.权利要求1的方法，其中先形成所述样品与所述酸性溶液的混合物，再进行所述混合物与所述固相合并的步骤。

5.权利要求1的方法，其中所述固相选自颗粒、微颗粒、纤维、珠子、膜、试管和微孔。

6.权利要求1的方法，其中所述固相包含基质部分和核酸结合部分。

7.权利要求6的方法，其中所述基质部分选自二氧化硅、玻璃、不溶性合成聚合物、不溶性多糖、金属、金属氧化物和金属硫化物。

8.权利要求6的方法，其中所述基质部分选自包被二氧化硅、玻璃、合成聚合物或不溶性多糖的磁响应材料。

9.权利要求1的方法，其中所述固相包含直径小于10微米的微颗粒。

10.权利要求9的方法，其中所述微颗粒是磁响应性的。

11.权利要求9的方法，其中使用多于一种尺寸之颗粒的混合物。

12.权利要求11的方法，其中至少一种尺寸的颗粒具有核酸结合部分，至少一种其它尺寸的颗粒不具有核酸结合部分。

13.权利要求6的方法，其中所述固相材料还包含共价连接的核酸结合部分，该核酸结合部分允许捕获和结合核糖核酸。

14.权利要求1的方法，其中所述固相材料还包含非共价连接的核酸结合部分，该核酸结合部分允许捕获和结合核糖核酸。

15.权利要求1的方法，其中所述固相材料还包含基于二氧化硅的材料，其被共价引入的表面官能团所官能化，所述官能团用于破坏细胞和吸引核酸，并且所述官能团选自羟基、硅烷醇基、羧基、氨基、铵、季铵和季鏻盐以及叔鋶盐。

16.权利要求1的方法，其中所述固相材料还包含具有共价引入之表面官能团的聚合物材料，所述官能团用于破坏细胞和吸引核酸，并且所述官能团选自羟基、硅烷醇基、羧基、氨基、铵、季铵和季鏻盐以及叔鋶盐。

17.权利要求13的方法，其中所述核酸结合部分包含多个核酸结合基团，其选自羧基、NH₂、烷基胺、和二烷基胺基、季鎓或叔鎓基团或者多于一种这些基团的混合物。

18.权利要求17的方法，其中所述核酸结合部分包含多个核酸结合基团，其选自三烷基季铵、三烷基季鏻、三芳基季鏻、混合烷基芳基季鏻基团以及叔锍基。

19.权利要求13的方法，其中所述核酸结合基团选自三烷基季铵和三烷基季鏻基团，其中每个烷基都具有至少4个碳原子，并且其中所述核酸结合基团引起细胞和病毒裂解以释放核糖核酸。

20.权利要求6的方法，其中所述固相结合材料包含通过可选择性切割之连接键结合到基质上的核酸结合基团。

21.权利要求1的方法，其中所述酸性溶液包括pH在1-5范围内的水溶液。

22.权利要求21的方法，其中所述酸性溶液包括pH在2-4范围内的水溶液。