[发明专利]评估解冻细胞的存活能力的方法

权利要求书

1.一种评估解冻细胞的存活能力的方法，其中所述细胞是配子、胚胎、 核体、推定的干细胞群体、干细胞前体群体或者干细胞群体，所述方法包括 在含有众多氨基酸的培养基中培育解冻细胞和测定该培养基中至少一种氨 基酸的浓度变化。

2.根据权利要求1的方法，其还包括如果所述变化满足预定的标准则 选择所述的解冻细胞用于进一步发育的步骤。

3.根据权利要求1或2的方法，其中培养基包含Earle′s平衡盐溶液， 所述Earle′s平衡盐溶液补充有葡萄糖、L-乳酸、丙酮酸以及氨基酸的生理混 合物。

4.根据任意前述权利要求的方法，其中使用HPLC然后是以邻苯二甲 醛的衍生化来测量在已用的培养基中氨基酸的浓度。

5.根据任意前述权利要求的方法，其中产生了氨基酸消耗或生成模式。

6.根据权利要求5的方法，其中所述氨基酸消耗或生成模式整体上用 作评估解冻细胞的存活能力的选择标记。

7.根据权利要求6的方法，其中最有活力的解冻细胞的选择是基于通 常包括2至7种氨基酸的一组氨基酸，这组氨基酸的消耗或生成模式是该物 种的健康、发育中的解冻细胞的指示。

8.根据权利要求6的方法，其中最有活力的解冻细胞的选择是基于单 一的氨基酸，其消耗或生成模式是该物种的健康、发育中的细胞的指示。

9.根据任意前述权利要求的方法，其中所述解冻细胞源于任意的生物 体，该生物体包括人、牛、猪、羊、任意家畜或者稀有和/或受胁物种。

10.根据权利要求9的方法，其中该方法用于人。

11.根据权利要求10的方法，其中用于选择标记的氨基酸包括谷氨酸、 谷氨酰胺、甘氨酸、精氨酸、丙氨酸、赖氨酸中的一种或它们的组合。

12.根据权利要求10的方法，其中用于选择标记的氨基酸是谷氨酰胺、 甘氨酸和丙氨酸。

13.一种区分有发育能力的和发育停止的等级I胚胎的方法，其包括在 含有众多氨基酸的培养基中培育等级I胚胎和测定该培养基中至少一种氨基 酸的浓度变化。

14.根据权利要求13的方法，其还包括如果所述变化满足预定的标准 则选择所述的等级I胚胎用于进一步发育的步骤。

15.根据权利要求13或权利要求14的方法，其中产生了氨基酸消耗或 生成模式。

16.根据权利要求15的方法，其中所述氨基酸消耗或生成模式整体上 用作评估细胞的存活能力的选择标记。

17.根据权利要求16的方法，其中最有活力的细胞的选择是基于一组 氨基酸，优选赖氨酸、甘氨酸、色氨酸、精氨酸、谷氨酸和谷氨酰胺。