[发明专利]酪蛋白纳米粒子

说明书

技术领域

本发明涉及生命科学或者医疗诊断等领域中使用的纳米粒子。更详细地，本发明涉及含有活性物质的酪蛋白纳米粒子。 

背景技术

一直希望微粒材料可以在生物技术中广泛应用。特别是，近年来，随着纳米技术的发展，对在生物技术和医疗中应用发明出的纳米微粒材料进行了大量的研究，还报道了大量的研究成果。 

在药物传递系统(DDS)的领域中，从很早开始就强烈期待纳米粒子的加入，极其希望纳米粒子能作为药剂和遗传因子的载体。特别是，使用高分子胶粒的研究极为盛行，但是在大部分的情况下，AB型或ABA型嵌段共聚物是由于其结构简单而被使用的。高分子胶粒的特征包括：大的药物容量、高水溶性、高结构稳定性、非蓄积性、小粒径(100nm以下)、功能分离性。由此，以对标的部位的指定性以及疏水性药物的可溶化性为目的，进行了研究。 

近年来，在化妆品中，通过引入以纳米技术为代表的各种新技术，而提高功能性、实用性、或者构成与其它公司产品区别，而且可以得到更明显的皮肤效果。皮肤通常由于角质层作为阻隔层存在，而使药物对皮肤的渗透性低下。为了充分发挥出对皮肤的效果，不可欠缺的是改善有效成分对皮肤的透过性。另外，即使对皮肤有高的有效性，但是很多成分由于保存稳定性差，或者容易对皮肤产生刺激，所以难以形成制剂。为了解决这些问题，以改善经皮吸收性和提高保存稳定性、降低皮肤刺激性等为目的，开发了各种各样的胶囊。目前，还对超微细乳化和脂质体等各种材料进行了研究(例如，非专利文献1)。但 是，乳化使用的表面活性剂在安全性方面有所保留，而且，离子络合物形成的结构与共价键相比，稳定性差。 

可以推测使用高分子材料在保存稳定性和生物体内的粒子稳定性方面有大幅度的改善。但是，大部分研究是使用以乳化聚合为代表的合成高分子，与低分子相比，虽然毒性有所减轻，但是必须解决某种程度的毒性，所以需要更安全的载体。 

天然高分子和合成高分子同样地，显示出高的结构稳定性，而且与合成高分子相比，安全性更高，还兼具作为DDS载体的优点。但是，与合成高分子相比，天然高分子载体的难点在于粒子的制造方法。作为天然高分子的粒子制造方法可以使用的有喷雾干燥、冷冻干燥和喷射磨，但是在大部分的情况下，粒子的大小都是微小尺寸(microsize)，大小的控制困难。 

在专利文献1中，提出了含有活性化合物的多核(multi-core)结构的固体配制品，粒子大小为5～3000μm。另外，在专利文献2中，提出了使用高分子材料的纳米粒子经皮吸收剂，该纳米粒子经皮吸收剂是使用表面活性剂的乳化物，如前所述，对安全性和稳定性有点担忧。此外，在专利文献3中，记载了球形的蛋白质粒子，但是作为含有药物的组合物的粒子大小为1μm以上。包括上述物质，到目前为止已知的高分子纳米粒子还没有提及合成高分子，即使是天然高分子，在粒子形成过程中，使用表面活性剂和聚合物单体、化学交联剂等，在安全性方面有问题。 

然而，酪蛋白是乳汁中含有的不溶于水的蛋白质。由于疏水性部分朝向外面，所以容易制造集合体，聚集10-100个酪蛋白，形成20nm左右的亚胶粒，进而聚集100-1000个酪蛋白，形成90-150nm的酪蛋白胶粒。酪蛋白胶粒进一步聚集，形成500nm左右的胶粒缔结体。因此，酪蛋白胶粒的尺寸分布广，添加钠、镁等盐，以及使pH为酸性，就可以产生凝聚。

非专利文献1：西田光广，普雷古兰思嘉纳陆(フレグランスジヤ—ナル)，11月，17(2005) 

专利文献1：特开2002-204673号公报 

专利文献2:特开2002-308728号公报 

专利文献3:特表2005-500304号公报 

发明内容

本发明的课题在于解决上述现有技术的问题。也就是，本发明的课题在于提供可以不使用表面活性剂和合成高分子制造的，可以控制大小，且在酸性中稳定，以及内含活性物质的纳米粒子及其制造方法。 

本发明人为了解决上述问题进行了认真的研究，结果发现将酪蛋白混合到pH为8以上、小于11的碱水性介质中，添加至少1种活性物质，将该溶液注入到pH3.5～7.5的酸性水性介质中，或者将该溶液从等电点下降到pH偏离1以上的pH，从而制造内含活性物质的纳米粒子，由此完成本发明。 

也就是，根据本发明提供通过下述工序(a)到(c)制造的内含活性物质的平均粒径为10nm以上、小于300nm的酪蛋白纳米粒子。 

(a)将酪蛋白混合到pH为8以上、pH小于11的碱性水性介质中的工序；