[发明专利]T细胞测定

权利要求书

1.一种用于测量对测试物质的辅助性T细胞应答的方法，其包括下 列步骤：

(a)从获自生物体的样品中分离抗原递呈细胞(APC)和T细胞；

(b)从所分离的细胞中排除CD25^hi调节T细胞和CD8⁺T细胞；

(c)使所述APC和在(b)中获得的排除了CD25^hi调节T细胞和 CD8⁺T细胞的细胞与所述测试物质一起孵育；以及

(d)测定对所述测试物质的T细胞应答，

其中所述方法不用于疾病的诊断或治疗。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(a)还包括将抗原递呈细 胞(APC)从其他细胞分开；并且步骤(c)包括在随后加入排除了CD25^hi调节T细胞和CD8⁺T细胞的细胞前，使所述测试物质与所分离的APC一 起孵育。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述APC在加入所述测试物质 前用细胞因子处理。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述APC和T细 胞来自于外周血单核细胞(PBMC)。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述APC和T细胞是人类的。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述T细胞应答通过测量T细 胞增殖、细胞因子释放、T细胞转录变化和/或与T细胞活化关联的其他标 志物的任何一个或多个来测定。

7.根据权利要求6所述的方法，其中T细胞增殖通过氚化胸腺嘧啶 的摄取来测量。

8.根据权利要求6所述的方法，其中细胞因子释放通过IL-2和/或IFNγ 的释放来测量。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述T细胞应答在孵育过程中 超过一个的时间点测定。

10.根据权利要求2所述的方法，其中在添加所述排除了T细胞的细 胞前，使所述APC与所述测试物质一起孵育超过一个时长。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述测试物质以多于一种浓度 测定。

12.根据权利要求1所述的方法，其中测定已知为诱导T细胞应答的 化合物以确定用于测定所述测试物质的最佳时间和/或浓度。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述测试物质是蛋白质。

14.根据权利要求1所述的方法，其中所述测试物质是肽。

15.根据权利要求1所述的方法，其中所述测试物质是非蛋白质。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述测试物质是有机分子。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述有机分子是脂质或碳水化 合物。

18.根据权利要求15所述的方法，其中所述测试物质是共轭物。

19.根据权利要求15所述的方法，其中所述测试物质是混合物。

20.根据权利要求15所述的方法，其中所述测试物质是制剂。

21.根据权利要求1所述的方法，其中所述测试物质具有对T细胞和 /或APC的免疫调节性或毒性。

22.根据权利要求4所述的方法，其中使用了表达的HLA同种异型 代表了世界上种群或被研究种群表达的>80％的供体PBMC。

23.根据权利要求4所述的方法，其中供体PBMC用于代表与被研究 疾病关联的特定HLA同种异型。

24.根据权利要求1所述的方法，其中测试了蛋白质序列的重叠肽， 以鉴定所述蛋白质序列中的T细胞表位。

25.根据权利要求13至20中任一项所述的方法，其中分别测试了一 系列分子以评估相对免疫原性。