[发明专利]在活体细胞中筛选配体与受体结合的方法和系统

权利要求书

1.一种通过检测与细胞膜受体结合的配体来高通量筛选药物的方法，其特征在于，包 括以下步骤：

用细胞外能被洗脱的荧光染料和配体的混合物对细胞进行孵育；和

在所述细胞中检测含有染料的内吞囊泡。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，包括在孵育后、检测前漂洗细胞，从而去除细 胞外染料。

3.如权利要求1-2中任一权利要求所述的方法，所述的细胞膜受体是G蛋白偶联受体或 酪氨酸激酶受体家族中的一种。

4.如权利要求1-2中任一权利要求所述的方法，其特征在于使用显微镜进行检测。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的显微镜是共聚焦显微镜。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，在一张或多张光学图片中进行检测。

7.如权利要求1-2中任一权利要求所述的方法，其特征在于，该方法进一步包括获得一 个或多个细胞内含染料的内吞囊泡的图像的步骤。

8.如权利要求3所述的方法，其特征在于，该方法进一步包括获得一个或多个细胞内含 染料的内吞囊泡的图像的步骤。

9.如权利要求4所述的方法，其特征在于，该方法进一步包括获得一个或多个细胞内含 染料的内吞囊泡的图像的步骤。

10.如权利要求1-2中任一权利要求所述的方法，其特征在于，该方法进一步包括对细 胞内含染料内吞囊泡进行定量的步骤。

11.如权利要求1-2中任一权利要求所述的方法，其特征在于，该方法进一步包括以时 间为可变因素进行的检测步骤。

12.如权利要求1-2中任一权利要求所述的方法，其特征在于，在一个多孔板的单个孔 中操作此法。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述方法由自动装置操作。

14.如权利要求2所述的方法，其特征在于，该方法还进一步包括下列步骤：

漂洗细胞后，用第二种染料和第二种配体孵育细胞；和

于检测前，漂洗细胞以去除细胞外的第二种染料和第二种配体。

15.如权利要求1-2中任一项所述的方法，所述方法包括用包括如下部分的系统筛选与 细胞膜结合的配体：

自动液体操作装置；

x-y方向载物台；

观察单个细胞内吞囊泡成像的显微镜配置；和

控制x-y载物平台和显微镜移动的控制装置。

16.如权利要求15所述的方法，其所述的控制装置还包括用于分析内吞囊泡的软件。

17.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述的显微镜是共聚焦显微镜。

18.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述x-y方向载物台上夹持培养皿，所述培 养皿是多孔板。