[发明专利]新的胎儿甲基化标记物有效
申请号: | 200780016025.9 | 申请日: | 2007-05-03 |
公开(公告)号: | CN101512014A | 公开(公告)日: | 2009-08-19 |
发明(设计)人: | 卢煜明;赵慧君;詹兆冲;丁春明;陈君赐;兴南·艾维·王;袁嘉进 | 申请(专利权)人: | 香港中文大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 | 代理人: | 王达佐;韩克飞 |
地址: | 中国香*** | 国省代码: | 中国香港;81 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 胎儿 甲基化 标记 | ||
1.检测来自孕妇的生物样品中胎儿DNA存在的试剂盒,所述试剂盒包括:(a)差异修饰所述样品中的甲基化和非甲基化DNA的试剂;和
(b)检测所述样品中甲基化的RASSF1A的DNA序列的试剂,其中所述DNA序列的存在指示样品中胎儿DNA的存在,所述DNA序列的缺乏指示样品中胎儿DNA的缺乏。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其中所述样品是全血。
3.如权利要求1所述的试剂盒,其中所述样品是血浆。
4.如权利要求1所述的试剂盒,其中所述样品是血清。
5.如权利要求1所述的试剂盒,其中所述样品是尿液。
6.如权利要求1所述的试剂盒,其中所述样品是唾液。
7.如权利要求1所述的试剂盒,其中所述试剂(a)消化非甲基化的DNA但不消化甲基化的DNA。
8.如权利要求7所述的试剂盒,其中所述试剂(a)是甲基化敏感酶。
9.如权利要求8所述的试剂盒,其中所述甲基化敏感酶是甲基化敏感的限制性内切酶。
10.如权利要求9所述的试剂盒,其中所述甲基化敏感的限制性内切酶是Hpa II或者BstU I。
11.如权利要求1所述的试剂盒,其中所述试剂(a)包括亚硫酸氢盐。
12.如权利要求1所述的试剂盒,其中试剂(b)包括扩增试剂。
13.如权利要求12所述的试剂盒,其中所述扩增试剂是聚合酶链式反应(PCR)试剂。
14.如权利要求13所述的试剂盒,其中所述PCR是实时PCR。
15.如权利要求1所述的试剂盒,其中试剂(b)用于测定DNA序列的数量。
16.如权利要求1所述的试剂盒,其中试剂(b)用于指示样品中胎儿DNA的存在,所述试剂盒还包括以下试剂:
(c)测定第二样品中第二胎儿DNA序列的数量的试剂,其中所述第二样品与用所述试剂(a)处理前的样品相同,并且所述第二胎儿DNA序列不是RASSF1A;和
(d)标准对照,其中第二胎儿DNA序列的数量相对于对照的增加指示妊娠相关病症的存在或者患妊娠相关病症风险的增加。
17.如权利要求16所述的试剂盒,其中所述的第二样品不经任何差异修饰甲基化和非甲基化DNA的试剂的处理。
18.如权利要求16所述的试剂盒,其中将所述的第二样品在测定第二胎儿DNA序列的数量前用所述试剂(a)处理。
19.如权利要求16所述的试剂盒,其中将所述的第二样品在测定第二胎儿DNA序列的数量前用差异修饰甲基化和非甲基化DNA的不同于试剂(a)的第二种试剂处理。
20.如权利要求16所述的试剂盒,其中所述妊娠相关病症是先兆子痫、早产或者宫内发育迟缓(IUGR)。
21.如权利要求1所述的试剂盒,其中试剂(b)用于指示样品中胎儿DNA的存在,所述试剂盒还包括以下试剂:
(c)检测第二样品中的第二胎儿DNA序列的试剂,其中所述第二样品与用所述试剂(a)处理前的样品相同,所述第二胎儿DNA序列是RhD血型的基因、ABO血型的基因、RhC血型的基因、RhE血型的基因、HLA型的基因、或者位于Y染色体的基因、或者包含预定突变的基因,其中所述第二胎儿DNA序列的存在指示胎儿基因组中所述RhD血型、所述ABO血型、所述RhC血型、所述RhE血型、所述HLA型、所述Y染色体或者所述突变的存在。
22.如权利要求21所述的试剂盒,其中所述第二样品不经任何差异修饰甲基化和非甲基化DNA的试剂的处理。
23.如权利要求21所述的试剂盒,其中试剂(c)包括扩增试剂。
24.如权利要求23所述的试剂盒,其中所述扩增试剂是聚合酶链式反应(PCR)试剂。
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