[发明专利]治疗用靶向细胞因子的抗体

说明书

发明领域

本发明涉及融合蛋白，所述融合蛋白包含与下述细胞因子相融合 的抗体、其功能性片段和其功能性衍生物，所述的抗体及其功能性片 段或其功能性衍生物对癌胚纤连蛋白(oncofetal fibronectin；ED-B) 的胞外域或癌胚生腱蛋白(oncofetal tenascin)的至少一种胞外域具有 特异性结合亲和性，所述细胞因子选自IL-10，IL15、IL-24和GM-CSF。 本发明还涉及至少一种所述融合蛋白在制备药剂中的用途。特别是， 本发明涉及所述药剂用于治疗肿瘤或慢性炎性疾病，例如动脉粥样硬 化，关节炎和银屑病的用途。

发明相关领域

细胞因子是免疫调节蛋白，其中的一些已经在预临床和临床应用 于对抗癌症，以及干扰慢性炎性病症和感染性疾病。

重组细胞因子的治疗潜力经常因其严重的副作用受到限制，甚至 在低浓度下也是如此，所以阻碍了在目标组织施以足够的细胞因子浓 度。最近，单克隆抗体被应用于靶向和递送细胞因子到疾病位点以提 高它们的效价，使正常组织免受毒性影响。事实上，人们已对大量的 抗体-细胞因子融合蛋白进行研究，以将其应用于癌症治疗，通常具 有良好的结果。例如，应用特异于纤连蛋白(血管发生标记物)的ED-B 域的人抗体L19递送促炎细胞因子(例如，IL-2，IL-12或TNF)到实 体瘤，有时具有显著的治疗效果[请参见Neri & Bicknell，Nat.Rev. Cancer(2005)5：436-446，以及WO 01/62298]。然而，当用作单独试 剂或作为与单克隆抗体的融合配体时，许多细胞因子具有临床失败的 历史。例如，重组IL-2(“Proleukin”，Chiron)已被批准用于治疗具有 肾细胞癌的病人，但是对于这种适应症的应答率，典型地较低的(通 常低于20％)，并且对于其他类型的癌症甚至更低。其他细胞因子(例 如白介素-12或白介素-10，见下述)在一系列研究中没有显示出实 质的效率，其减缓了临床研究计划。这些细胞因子仍然没有批准为生 物药剂。干扰素γ是批准用于非常窄的适应症的细胞因子的另一例子 (治疗慢性肉芽肿病，Genentech)，其没有显示出对于其他适应症的 实质的治疗效果。

当与抗体相融合时，更是无法预知是否在治疗指数上显示显著效 果。例如，在大量的临床测试中，抗-GD2抗体-IL2融合EMD273063 并没有显示明显的治疗效果，最近的但并非最不重要的一次是针对具 有成神经细胞瘤进行的(Osenga等，Clin.Cancer Res.Mar 15； 12(6)：1750-9(2006))。

白介素-10(IL-10)是一种由活化的单核细胞和T细胞产生的同 源二聚体细胞因子，其与炎性反应和免疫反应的调节密切相关。已详 尽描述了它作为免疫反应的阻尼器(dampener)的主要总体功能，但 是IL-10还具有刺激活性。IL-10最初被描述为细胞因子合成抑制因子 (CSIF)，是小鼠Th2细胞产生的活性物质，其抑制Th1细胞的活化 和Th1细胞产生细胞因子[Fiorentino等，J.Exp.Med.170(6)：2081-95 (1989)]。编码人IL-10的基因位于染色体1上[Kim等，J.Immunol. 148(11)：3618-23(1992)]并且翻译出包含160个氨基酸、分子量为18.5 kDa的蛋白。人IL-10作为37kDa的非-二硫键连接同源二聚体发挥 活性[Syto等，Biochemistry 37(48)：16943-51(1998)]。