[发明专利]富含异构体的共轭亚油酸组合物的制备方法

说明书

本发明涉及一种组合物的生产方法。尤其是，本发明涉及包含共 轭亚油酸(CLA)的顺9，反11和反10，顺12异构体，并且一种异 构体比另一种异构体含量丰富的组合物的生产方法。

人们对于食品中的共轭长链多不饱和脂肪酸，如CLA，对于动物 和人类的有益作用的认识由来已久。CLA是含18个碳原子的共轭二烯 脂肪酸。由于CLA中有两个双键，因此可能存在几何异构现象并且 CLA分子或半族可存在许多异构体形式。CLA中顺9，反11(“c9t11”) 和反10，顺12(“t10c12”)异构体通常最丰富，并且已经鉴定出这两 种异构体每一种均具有有益的药理作用。

由于顺9，反11和反10，顺12异构体在化学合成的CLA混合物 中的含量通常是大约等摩尔数的，因此，人们需要可将这两种异构体 纯化或使混合物富含其中一种异构体的方法。特别是由于一种异构体 的药理作用可会与另一种异构体明显不同，富含其中一种异构体的 CLA混合物可有有利的药理作用。

专利WO97/18320描述了高含量长链多不饱和脂肪酸物质的制备 方法。该方法包括使用能够辨别不同几何异构体的酶。

Nagao等人的文章(JAOCS，volume79，no3，(2002)，pages303 to308)描述了通过皱褶念珠菌脂酶的选择性酯化作用分馏和富集CLA 异构体。使用月桂醇以形成酯类。

Haas等人的文章(Lipids，Volume34，no9，(1999)，pages979to 987)描述了共轭亚油酸异构体的脂酶催化分馏。该方法是小规模进行 的并且该文献得出的结论是酶催化的酯化作用比水解作用更切合实 际。

专利US20010025113描述了富含异构体的CLA组合物。在其中 一个例子中，富含异构体的混合物可通过使来自共轭后产生的1:1异构 体混合物的乙酯混合物结晶而获得。该方法需要在低于-57℃的非常 低的温度下进行。

专利US6420577公开了商业上制备CLA的方法。用结晶纯化CLA 但不分离不同异构体。

Berdeaux等人(JAOCS，Volume75，no12(1998)，pages 1749-1755)和Kim等人(J.Food Sci.Nutr，Volume5，no2(2000)， pages86-92)的文章公开了包括碱-异构化亚油酸甲酯的甲基脂类的 分离和纯化的亚油酸共轭异构体的制备方法。

Kim等人(J.Food Sci.Nutr，Volume5，no1(2000)，pages10-14) 公开了从红花油(SSO)中化学合成高纯度CLA的制备方法。

专利WO2005/087017公开了富含CLA的顺10，反12异构体的组 合物和富含CLA的反9，顺11异构体的组合物的合成方法。

尽管CLA异构体混合物的生产方法是已知的，但使一种异构体的 量增加至相对高的水平仍存在困难。例如，依赖于与另一种异构体相 比，对一种异构体具有选择性的脂酶的方法需要使反应不完全进行， 因此，这是产量和异构体富集程度的折衷。人们仍然需要富含一种异 构体的CLA异构体混合物的制备方法，这种方法使一种异构体的产量 和/或含量相对于另一种异构体的相对较高并且这种方法能以相对大的 规模相对经济的条件下进行，例如，不需要非常低的温度(如低于-57 ℃)。

CLA异构体的分离通常是以酯类形式的CLA异构体进行。这样做 的理由被认为是由于酯类与游离酸的熔点差别较大。熔点上的较大差 别使得酯类比游离酸易于通过结晶分离。事实上，文献中将相应游离 酸的异构体的分离描述成几乎是不可能的(见，例如，专利US 2001/0018453)。此外，Jain等人(J.Agric，Food Chem，Volume54(2006)， pages5590-5596)认为正是这些异构体的不可分离性限制了其商业应 用。然而，分离酯类可需要额外的自游离酸形成酯类的步骤，这一步 骤可能是昂贵和费时的。因此，仍然特别需要富含一种异构体的CLA 异构体混合物的能够克服上述问题的制备方法。

本发明提供了包含共轭亚油酸(CLA)的顺9，反11和反10，顺 12异构体的组合物的制备方法，该方法包括：