[发明专利]产生转基因动物的组合物和方法

权利要求书

1.一种产生转基因动物的方法，包括：在这样的条件下给怀孕的动物直接注射包括目标序列的DNA，以便怀孕的动物分娩对所述目标序列而言为种系转基因的后代。

2.权利要求1的方法，其中所述动物是非人哺乳动物。

3.权利要求1的方法，其中所述动物是啮齿类动物。

4.权利要求1的方法，其中所述的注射包括注射DNA到静脉或其他的脉管中，或接近静脉或其他的脉管。

5.权利要求1的方法，其中所述的注射包括静脉注射到所述怀孕动物的尾静脉中。

6.权利要求1的方法，其中使怀孕的动物作好进行至少一次注射的准备，而且其中通过插入中空的装置到怀孕动物的血液输送脉管中，或接近怀孕动物的血液输送脉管，并通过该中空的装置引入DNA到血液输送脉管中或接近血液输送脉管来施用DNA，以便容许传递所述的核酸物质到所述胚胎中。

7.权利要求6的方法，其中怀孕动物的准备包括选自以下的至少一个步骤：扩张怀孕动物的血液输送脉管，加温怀孕动物，固定怀孕动物的血液输送脉管，麻醉怀孕动物，充分地固定怀孕动物以容许插入中空的装置到血液输送脉管中，和使怀孕动物固定血液输送脉管，其中在移植胚胎到子宫壁以后并在胚胎中建立胎循环之前引入DNA；和其中以足够低的引入压力引入DNA以免杀死该怀孕动物。

8.权利要求1的方法，其中所述DNA包括含有所述目标序列的质粒。

9.权利要求1的方法，其中所述目标序列编码标记蛋白。

10.权利要求1的方法，其中所述目标序列编码肽。

11.权利要求8的方法，其中所述肽是抗体或其片段。

12.权利要求1的方法，其中所述目标序列编码siRNA。

13.权利要求1的方法，其中所述目标序列编码有疗效的蛋白。

14.权利要求1的方法，更进一步包括饲养所述后代以产生后代的F1和随后的世代的步骤，该后代的F1和随后的世代都是所述目标序列转基因的。

15.权利要求1的方法，更进一步包括检测所述后代中所述目标序列的存在的步骤。

16.权利要求1的方法，更进一步包括检测所述后代中所述目标序列的表达的步骤。

17.权利要求14的方法，更进一步包括检测后代的所述F1和随后世代中所述目标序列的存在的步骤。

18.权利要求14的方法，更进一步包括检测后代的所述F1和随后世代中所述目标序列的表达的步骤。

19.权利要求1的方法，其中所述怀孕的动物在妊娠的第一个60％时期内。

20.权利要求1的方法，其中所述动物是家畜动物。

21.权利要求1的方法，其中所述动物是陪伴动物。

22.权利要求1的方法，其中所述动物是灵长类动物。

23.通过权利要求2的方法产生的转基因后代。

24.通过权利要求14的方法产生的转基因F1代动物。

25.一种组合物，其包括通过应用权利要求1的方法产生的转基因动物的种系细胞。

26.一种改变胚胎中基因表达的方法，包括：a)提供携带胚胎的怀孕动物；和b)在容许核酸从所述怀孕动物传递到所述胚胎，而且其中所述核酸在所述胚胎中是生物学活性的条件下，施用所述核酸给所述怀孕动物。