[发明专利]在结肠癌治疗中的前胃泌素抑制剂

说明书

发明领域

本发明涉及用于治疗和预防结直肠癌、腺瘤性息肉病和转移的方法和 组合物。

发明背景

在66％的病例中，人类结肠的肿瘤发生涉及肿瘤抑制剂基因腺瘤性结 肠息肉病(APC)的或在β-连接素基因中的体细胞突变(由下列参考文献计 算的平均值：(Conlin等人，2005；De Filippo等人，2002；Huang等人， 1996；Johnson等人，2005；Kim等人，2003；Luchtenborg等人，2005； Mikami等人，2006；Morin等人，1997；Powell等人，1992；Rowan等 人，2000；Segditsas和Tomlinson，2006；Shitoh等人，2004；Smith等 人，2002；Sparks等人，1998；Suraweera等人，2006；Takayama等人， 2001))。这些突变被认为是在散发性结直肠癌患者中发生的结直肠癌发生 的早期事件。apc基因中的生殖细胞突变也响应于家族性结肠息肉病，一 种与肠癌的高风险相关的遗传综合症。这些突变导致粘着连接蛋白β-连 接素的细胞质库的缺陷性调控，引起Tcf-4-介导的转录通路的组成性激 活。该组成性激活引起诸如c-myc或细胞周期蛋白D1的Tcf4目标基因 的高水平转录。该通路的另一可能目标是编码前胃泌素激素原的GAST 基因。已显示该基因的转录在体外β-连接素/Tcf4复合体的激活后被增加 (Koh等人，2000)。

前胃泌素在结肠癌发生中的作用首先在约15年前被提出，当前胃泌 素在结直肠肿瘤提取物中被发现时(Finley等人，1993；Kochman等人， 1992；Nemeth等人，1993)，和当前胃泌素的血浆水平被显示为在约75％ 的患有结直肠肿瘤的患者中升高时，而在对照中未检测到(Ciccotosto等 人，1995；Konturek等人，2002；Siddheshwar等人，2001；Van Solinge 等人，1993)。基于这些观察，前胃泌素能与结肠癌发生有关的理论已经 在体外和体内被研究。研究首先显示，甘氨酸延长型胃泌素(前胃泌素成 熟产物之一)对增殖起阳性效果(Hollande等人，1997；Koh等人，1999； Litvak等人，1999；Singh等人，1994；Stepan等人，1999)。同时显示， 在肝脏中的前胃泌素的过量表达诱导肠上皮细胞中的有丝分裂发生，而 其形成较小的肽在肝脏中不能发生(wang等人，1996)。所述相同的转基 因小鼠被用以证明前胃泌素的过量表达诱导氧化偶氮甲烷诱导的癌发生 的敏感性(Singh等人，2000)。然而，当敲除胃泌素基因也诱导相同的癌 发生敏感性被显示时，所述观测被挑战(Cobb等人，2002)。然而，前胃 泌素的增殖效果被进一步在体外用大鼠肠细胞系IEC6证明(Brown等人， 2003)，并在体内用受控于fabp启动子的显示前胃泌素的肠过量表达的转 基因小鼠模型中证明(Cobb等人，2004)。然而，所述小鼠模型的主要缺 点是，前胃泌素在肠上皮细胞的分化细胞中，而不在增殖细胞中被过量 表达。在2003和2005年，Ottewell等人提供数据，其关于在DNA损伤 后，前胃泌素刺激鼠结肠上皮细胞有丝分裂，以及关于前胃泌素的羧基 末端26-氨基酸残基在体内足以对鼠结肠上皮细胞中的有丝分裂产生刺 激(Ottewell等人，2005；Ottewell等人，2003)。

基于主要源自过量表达试验的这些数据，前胃泌素被接受为肠上皮细 胞的“生长因子”。相反，仅有三个研究在体外和一个在体内设法耗尽细 胞。在体外，2个前胃泌素产生细胞系被胃泌素基因反义转染，显示在裸 鼠中集落形成以及肿瘤植入被缺失(Singh等人，1996)。然而重要的是， 没有论证这些阻断效果归属于哪一个胃泌素基因产物。更近的研究证明， 前胃泌素缺失使稳固粘着和紧密连接在肠上皮细胞中恢复，使前胃泌素 与移植激活相联系(Hollande等人，2003)。最后，最终的体外研究专注于 甘氨酸延长型胃泌素17(前胃泌素的成熟产物)的作用，因为在研究中所 用的细胞分泌大量所述肽，但是非常少的前胃泌素(Hollande等人，1997)。 在体内，上述KO小鼠对肿瘤发生更敏感。