[发明专利]寡肽的纯化方法

权利要求书

1、一种寡肽的纯化方法，包括使含有所述寡肽及中性氨基酸的溶液在有效pH范围内与离子交换树脂接触的工序。

2、如权利要求1所述的方法，包括下述工序：(a)将含有寡肽及中性氨基酸的溶液通过填充有离子交换树脂的柱的工序，以及(b)将与离子交换树脂接触的所述寡肽用洗脱溶剂洗脱的工序。

3、如权利要求1或2所述的方法，其中，离子交换树脂为弱酸性阳离子交换树脂。

4、如权利要求3所述的方法，其中，离子交换树脂为具有羧基或酚羟基的树脂。

5、如权利要求3或4所述的方法，其中，含有寡肽及中性氨基酸的溶液的pH在4～14的范围。

6、如权利要求3或4所述的方法，其中，含有寡肽及中性氨基酸的溶液的pH在5～12的范围。

7、如权利要求1或2所述的方法，其中，离子交换树脂为弱碱性阴离子交换树脂。

8、如权利要求7所述的方法，其中，离子交换树脂为具有选自氨基、低级烷基氨基及二低级烷基氨基中的基团的树脂。

9、如权利要求7所述的方法，其中，离子交换树脂为具有选自氨基、甲基氨基及二甲基氨基中的基团的树脂。

10、如权利要求7～9中任一项所述的方法，其中，含有寡肽及中性氨基酸的溶液的pH在0～9的范围。

11、如权利要求7～9中任一项所述的方法，其中，含有寡肽及中性氨基酸的溶液的pH在1～7的范围。

12、如权利要求1～11中任一项所述的方法，其中，中性氨基酸为选自L-氨基酸、作为其旋光异构体的D-氨基酸及它们的外消旋混合物、甘氨酸以及β-丙氨酸中的氨基酸，所述L-氨基酸选自L-丙氨酸、L-缬氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-蛋氨酸、L-色氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-半胱氨酸、L-酪氨酸、L-天冬酰胺及L-谷氨酰胺。

13、如权利要求1～11中任一项所述的方法，其中，中性氨基酸为选自L-丙氨酸、L-缬氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-酪氨酸、D-丙氨酸、D-缬氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨酸、D-酪氨酸、DL-丙氨酸、DL-缬氨酸、DL-亮氨酸、DL-异亮氨酸、DL-酪氨酸及谷氨酰胺中的氨基酸。

14、如权利要求1～13中任一项所述的方法，其中，寡肽为二肽或三肽。

15、如权利要求1～13中任一项所述的方法，其中，寡肽为二肽。

16、如权利要求14或15所述的方法，其中，二肽为用X-Y表示的二肽，式中，X表示丙氨酸，Y表示L-缬氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-酪氨酸、D-缬氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨酸、D-酪氨酸、DL-缬氨酸、DL-亮氨酸、DL-异亮氨酸、DL-酪氨酸或谷氨酰胺。

17、如权利要求1～16中任一项所述的方法，其中，构成寡肽的氨基酸为L-氨基酸。

18、如权利要求1～17中任一项所述的方法，其中，寡肽是选自下述(A)～(F)组成的组中的寡肽，

(A)用使来自枯草杆菌的肽合成酶作用于无保护的L-氨基酸进行制造的方法而得到的寡肽；(B)使具有L-氨基酸酰胺水解酶活性的酶或含酶物质作用于L-氨基酸酰胺及L-氨基酸而制造的寡肽；(C)使具有生成二肽的活性的蛋白质作用于L-氨基酸酯及L-氨基酸而制造的寡肽；(D)在氨基酸酯水解酶的作用下制造的寡肽；(E)在由属于稳杆菌属的细菌得到的酶的作用下制造的寡肽；以及(F)利用化学合成得到的寡肽。

19、一种寡肽的制造方法，包括使用权利要求1～18中任一项所述的方法的工序。

20、一种寡肽，是采用权利要求19所述的方法制造的寡肽。

21、如权利要求20所述的寡肽，不含作为杂质的氨基酸。