[发明专利]检测移植物抗宿主疾病易感性或移植相关死亡率的方法和试剂

说明书

关于联邦资助研究或开发的声明

本发明未使用任何政府基金。

发明背景

在移植中会发生移植物抗宿主疾病(GVHD)。在GVHD中，供 者T-细胞通过对受体身体发动攻击排斥受体组织和器官。许多其它疾 病涉及扰乱宿主免疫系统。一些疾病最好采用药物治疗，一些采用生 物制品治疗，另一些采用例如体外光分离置换法，其余疾病的治疗选 择非常有限。

现已证实体外光分离置换法(extracorporeal photopheresis，ECP) 可有效治疗一些T-细胞介导疾病。在GVHD中，光分离置换法用于与 局部曲安西龙软膏、抗真菌药、抗病毒药、抗生素、免疫球蛋白和甲 氨喋呤的联合治疗。ECP也可与免疫抑制剂例如麦考酚酸吗乙酯、他 克莫司、泼尼松、环孢霉素A、羟氯喹、类固醇、FK-506以及用于cGVHD 和顽固性cGVHD的沙利度胺联合使用。对实体(solid)器官移植，ECP 可与免疫抑制剂联合使用以降低与肾脏同种异体移植及心脏移植相关 的急性同种异体移植物排斥反应的数量。例如，ECP可与OKT3和/或 免疫抑制剂泼尼松、硫唑嘌呤、环孢霉素A联合使用以逆转急性肾脏 同种异体移植物排斥。ECP还可与环磷酰胺、分次全身照射、用于同 种骨髓移植的依托泊苷联合用于急性骨髓白血病、急性成淋巴细胞性 白血病、慢性骨髓白血病、非何杰金氏淋巴瘤或重度再生障碍性贫血。

发明概述

数种试验性策略已鉴定出ECP的药效学生物标记。pGvHD试验中 患者试样的流式细胞计数分析表明特定树突状细胞亚型的相对丰度可 预测GvHD发生倾向，也可反映ECP对该病变的影响。

流式细胞计数数据与中心实验室数据的相关性产生其它与DC细 胞比例相关的候选生物标记，进而消除了对流式细胞计数研究的需求。 此外，已鉴定出与研究中DC细胞亚型相关的B细胞亚型。本发明提 供一组易测定的并在共同分析时提供ECP作用和疾病进展的统计学上 有力(statistically robust)测定的标记。

附图简述

图1显示了临床试验和研究设计。

图2显示了PBMC的细胞计数表型分析。

图3显示了预测严重GvHD的DC谱(profiles)。DC亚型随GvHD 级别变化。DC丰度热图以及(B.)中显示的CD11c+/CD11cDC曲线例 证了之后患有GvHD的患者中这些DC亚型相对表达的差异。(C.) 和(D.)显示了细胞表面标对数(logistic)回归分析的结果。此处，ROC 反映了应用该标记区分介于0或1级和严重GvHD人群。较好检查的 ROC接近1，最坏的检查ROC为0.5。

图4显示了预测TRM的DC谱。

图5显示了用不同生物标记建模并显示了本研究发现的TRM的最 佳预测因子是包括CD11c+DC和NK细胞的模型。

图6显示了A)预测GvHD的模型。在59个结果中，只有单核细 胞(ROC＝0.66)和中性粒细胞计数(ROC＝0.69)接近DC亚型对GvHD 的预测能力。B)预测TRM的模型。实验室数据与患者人口统计学联 合产生出对TRM有显著预测能力的模型。结果以独立方式(左下方) 和联合建模方式(右下方的ROC曲线)显示。该模型的ROC曲线包 括白蛋白、BUN/肌酸酐比例、供体匹配、匹配-亲缘关系和白蛋白相互 作用。C)相关细胞表面标记和实验室数据。使用Pearson′s相关性将 细胞表面标记数据与实验室结果进行比较以鉴别细胞谱和细胞计数分 析中的相关变化。

发明详述

本申请文件中引用的所有参考文献均完整并入本说明书。术语“受 试者”或“患者”可替换使用，并指动物，优选哺乳动物且更优选人 类。

“细胞群”一般包括血液中存在的细胞类型。该术语可包括一个 或多个血细胞类型，尤其是红细胞、血小板以及白细胞。细胞群可包 含白细胞亚型，例如，T细胞、树突状细胞、B细胞等等。在一个实施 方案中，细胞群可包含多种细胞类型的混合或集合。或者，细胞群可 包含基本上纯化的细胞类型，例如，T细胞或树突状细胞。