[发明专利]在高浓度蛋白质溶液中减少或防止液-液相分离的方法

权利要求书

1.确定浓度的方法，在该浓度下再配制在显示液-液相分离的蛋白质溶液中的蛋白质以便减少或防止在期望的温度下该蛋白质溶液的液-液相分离，该方法包括：

(a)允许显示液-液相分离的蛋白质溶液经历液-液相分离成为上部和下部液相；

(b)测量已经历了液-液相分离的蛋白质溶液中上部和下部相中蛋白质的浓度；和

(c)选择大于下部相蛋白质浓度的蛋白质浓度用于再配制蛋白质，以便减少或防止在所述期望的温度下蛋白质溶液中的液-液相分离。

2.确定蛋白质浓度的方法，在该浓度下再配制在显示液-液相分离的蛋白质溶液中的蛋白质以便减少或防止在期望的温度下该蛋白质溶液的液-液相分离，该方法包括：

(a)构建蛋白质溶液的相分离曲线；和

(b)选择在期望的温度下处于相分离曲线外的浓度，

其中在期望的温度下处于相分离曲线外的浓度是下述浓度，在该浓度下再配制蛋白质溶液中的蛋白质以便减少或防止在所述期望的温度下蛋白质溶液中的液-液相分离。

3.权利要求2的方法，其中通过温度猝熄方法或浊点方法构建相分离曲线。

4.权利要求2的方法，其中构建蛋白质溶液的相分离曲线包括：绘制在蛋白质溶液显示液-液相分离的至少两个或更多不同温度下蛋白质溶液的两个处于平衡中的共存液相的浓度，其中所述两个或更多不同温度的至少一个是期望的温度。

5.确定浓度的方法，以所述浓度在蛋白质溶液中配制蛋白质以减少或防止期望的温度下蛋白质溶液中的液-液相分离，所述方法包括：

(a)提供具有一种蛋白质浓度和第一温度的第一蛋白质溶液，在所述第一温度下第一蛋白质溶液显示液-液相分离；

(b)提供处于第一蛋白质溶液浓度和第二温度的第二蛋白质溶液，在所述第二温度下第二蛋白质溶液显示液-液相分离；

(c)允许来自(a)和(b)的蛋白质溶液经历液-液相分离成为上部和下部相；

(d)测量第一和第二蛋白质溶液的上部和下部相中蛋白质的浓度；

(e)构建相分离曲线，所述曲线指出在第一和第二温度下第一和第二蛋白质溶液处于平衡中的上部和下部相的浓度；和

(f)确定在期望的温度下处于相分离曲线外的浓度，

其中在期望温度下处于相分离曲线外的浓度是在蛋白质溶液中配制蛋白质从而减少或防止所述期望的温度下蛋白质溶液中的液-液相分离的浓度。

6.权利要求5的方法，其还包括：

(a)提供处于第一蛋白质溶液浓度和第三温度下的第三蛋白质溶液，在所述第三温度下第二蛋白质溶液显示液-液相分离；

(b)允许第一、第二和第三蛋白质溶液经历液-液相分离成为上部和下部相；

(c)测量第一、第二和第三蛋白质溶液的上部和下部相中蛋白质的浓度；

(d)构建相分离曲线，所述曲线指出在第一、第二和第三温度下第一、第二和第三蛋白质溶液处于平衡中的上部和下部相的浓度；和

(e)确定在期望的温度下处于相分离曲线外的浓度，

其中在期望温度下处于相分离曲线外的浓度是在蛋白质溶液中配制蛋白质从而减少或防止期望的温度下蛋白质溶液中的液-液相分离的浓度。

7.确定浓度的方法，以所述浓度在蛋白质溶液中配制蛋白质以减少或防止期望的温度下蛋白质溶液中的液-液相分离，所述方法包括：

(a)以第一种浓度在第一蛋白质溶液中提供蛋白质；

(b)以第二种浓度在第二蛋白质溶液中提供蛋白质；

(c)以第三种浓度在第三蛋白质溶液中提供蛋白质；

其中第一、第二和第三蛋白质溶液处于第一、第二和第三溶液基本澄清的温度下；

(d)将第一、第二和第三溶液冷却至第一、第二和第三溶液的浊点温度；和

(e)通过针对第一、第二和第三种浓度绘制第一、第二和第三蛋白质溶液的浊点温度来构建相分离曲线，

其中在期望温度下处于相分离曲线外的浓度是在蛋白质溶液中配制蛋白质从而减少或防止在所述期望的温度下蛋白质溶液中的液-液相分离的浓度。

8.权利要求1-7中任一项的方法，其中所述蛋白质选自受体、配体、转录因子、酶和抗体。

9.权利要求1-7中任一项的方法，其中所述蛋白质是多克隆抗体或其抗原结合片段。