[发明专利]在高浓度蛋白质溶液中减少或防止液-液相分离的方法

说明书

相关申请交叉参考

本申请要求于2006年6月12日提交的美国临时申请号60/812,760的权益，将其内容并入本文作为参考。

发明领域

本发明一般涉及蛋白质制剂的领域。

发明背景

来自生物技术的蛋白质和肽药物的可得性为大量疾病的治疗和预防创造了新的选择。基于蛋白质的疗法，特别是基于单克隆抗体的疗法，已经成为治疗疾病如癌症、变应性疾病、哮喘和类风湿性关节炎的一种重要方法。

基于抗体的疗法一般以常规的间期施用给患者，并需要通过注射进行若干mg/kg的给药(dosing)。皮下注射是这些疗法的一个优选的施用途径。因为皮下注射使用的体积小(常为1.5mL)，所以对于高剂量抗体疗法而言，该施用途径需要高浓度的蛋白质制剂。

使用高浓度蛋白质溶液中的一个挑战是高于特定蛋白质浓度的蛋白质溶液中乳光(即混浊)的发生。该现象能够造成不均匀的溶液并影响蛋白质溶液的加工。另外，溶液的乳光可具有消极的商业后果。因此，期望获得澄清的蛋白质溶液，使得在加工期间操作简便且最终药物产品有更吸引人的外观。

因此，存在开发下述方法的需要，所述方法用于获得不是乳光的(即混浊的)高浓度蛋白质溶液。

发明概述

本发明涉及配制高浓度蛋白质溶液的方法。更明确地，本发明涉及减少或防止以高蛋白质浓度配制的蛋白质溶液的液-液相分离的方法。因此，本发明一般提供高浓度蛋白质溶液，其具有减少的乳光并因此视觉上(visibly)是澄清的。如本文中所述，视觉上澄清的溶液有助于加工期间操作的简便，并且作为商业化的产品更加吸引人。另外，本发明提供了使用蛋白质溶液的液-液相分离浓缩和纯化蛋白质的方法。

本发明一方面提供了测定蛋白质浓度的方法，在该浓度下再配制(reformulate)在显示液-液相分离的蛋白质溶液中的蛋白质以便减少或防止蛋白质溶液中的液-液相分离。更明确地，减少和/或防止液-液相分离的方法包括将溶液维持或调节至期望的温度。例如，一种方法包括允许显示液-液相分离的蛋白质溶液经历液-液相分离成为上部和下部液相。然后测量已经历了液-液相分离的蛋白质溶液的上部和下部相中蛋白质的浓度。大于蛋白质溶液下部相的蛋白质浓度的蛋白质浓度被选择用于再配制蛋白质。使用以此种方式测定的浓度配制蛋白质溶液减少或防止蛋白质溶液在期望温度下的液-液相分离。在某些实施方案中，期望温度下在蛋白质溶液中配制蛋白质的蛋白质浓度被选择为比下部相中蛋白质浓度高约0.5％到约40％。在其他实施方案中，期望温度下在蛋白质溶液中配制蛋白质的蛋白质浓度被选择为比下部相中蛋白质浓度高约0.5％到约5％、约5％到约10％、约10％到约20％、约20％到约30％、约30％到约40％、约5％到约20％、约5％到约30％，或约5％到约40％。

在本发明的其他方面中，下述方法包括构建蛋白质溶液的相分离曲线和选择在期望的温度下处于相分离曲线以外的浓度，所述方法用于测定下述蛋白质浓度，在该浓度下再配制在显示液-液相分离的蛋白质溶液中的蛋白质，以便减少或防止在期望的温度下蛋白质溶液中的液-液相分离。在期望的温度下处于相分离曲线外的浓度允许再配制在蛋白质溶液中的蛋白质以便减少或防止在期望的温度下蛋白质溶液中的液-液相分离。在该方面的某些实施方案中，通过绘制两个或多个不同温度下蛋白质溶液的处于平衡中的两种共存液相的浓度构建相分离曲线，所述温度下该蛋白质溶液显示液-液相分离。在某些实施方案中，两个或更多不同温度中至少一个是期望的温度。