[发明专利]将来自脐带基质的干细胞分化为肝细胞谱系细胞

权利要求书

1.一种使脐带基质细胞分化为肝细胞样细胞的方法，所述方法包括：

a.使脐带基质细胞与前诱导培养基接触；

b.使脐带基质细胞与分化培养基接触；和

c.使脐带基质细胞与成熟培养基接触；

所述接触时间足以使所述脐带基质细胞分化为肝细胞样细胞。

2.一种在体外评估化合物毒性的方法，所述方法包括：

a.使根据权利要求1由脐带基质细胞所分化的肝细胞样细胞与所 述化合物接触；和

b.测量所述肝细胞样细胞的生存力，其中与在所述化合物不存在 下的生存力比较，在所述化合物存在下的生存力的降低指示所述化 合物在体内具有毒性。

3.一种在体外评估化合物的活性的方法，其包括：

a.使根据权利要求1由脐带基质细胞所分化的代谢活性肝细胞样 细胞与所述化合物接触；和

b.测量所述肝细胞样细胞的代谢活性，其中与在所述化合物不存 在下的代谢活性比较，在所述化合物存在下的代谢活性的降低或升高 指示所述化合物在体内具有活性。

4.一种在体外评估化合物活性的方法，其包括：

a.使根据权利要求1由脐带基质细胞所分化的第一代谢活性肝细 胞样细胞与所述化合物接触，以产生细胞上清液；和

b.使根据权利要求1由脐带基质细胞所分化的第二代谢活性肝细 胞样细胞与所述上清液接触；和

c.测量所述第二肝细胞样细胞的代谢活性，其中与在所述上清液 不存在下的代谢活性比较，在所述上清液存在下的代谢活性的降低或 升高指示所述化合物在体内具有活性。

5.一种在体外评估化合物毒性的方法，其包括：

a.使根据权利要求1由脐带基质细胞所分化的第一代谢活性肝细 胞样细胞与所述化合物接触，以产生细胞上清液；

b.使根据权利要求1由脐带基质细胞所分化的第二代谢活性肝细 胞样细胞与所述细胞上清液接触；和

c.测量所述第二肝细胞样细胞的生存力，其中与在所述上清液不 存在下的生存力相比，在所述上清液存在下的生存力降低指示所述化 合物在体内具有毒性。

6.一种在体外评估化合物活性的方法，其包括：

a.使根据权利要求1由脐带基质细胞所分化的肝细胞样细胞与所 述化合物接触；和

b.测量在所述肝细胞样细胞中细胞色素P450基因的表达，其中与 在所述化合物不存在下细胞色素P450基因的表达比较，在所述化合物 存在下细胞色素P450基因的表达的升高或降低指示所述化合物在体 内具有活性。

7.一种在体外评估化合物活性的方法，其包括：

a.使根据权利要求1由脐带基质细胞所分化的第一代谢活性肝细 胞样细胞与所述化合物接触，以产生细胞上清液；和

b.使根据权利要求1由脐带基质细胞所分化的第二代谢活性肝细 胞样细胞与所述上清液接触；和

c.测量在所述第二肝细胞样细胞中细胞色素P450基因的表达，其 中与在所述上清液不存在情况下细胞色素P450基因的表达比较，在所 述上清液存在情况下的细胞色素P450基因的表达的升高或降低指示 所述化合物在体内具有活性。

8.权利要求6或权利要求7的方法，其中所述细胞色素P450基因表达使 用聚合酶链式反应测量。

9.权利要求6或权利要求7的方法，其中所述细胞色素P450基因表达通 过测量酶活性来测量。