[发明专利]用于树突状细胞免疫的靶向基因输送

说明书

发明背景

本发明主要涉及靶向基因输送，更具体的是使用包括靶向分子的重组病 毒，所述靶向分子靶向于树突状细胞并与其结合，从而可以用于树突状细胞的 免疫。

免疫是现代医学的一种最有效的医疗措施，但是具有很多的局限性。有些 传染性疾病例如HIV/AIDS，疟疾，和肺结核病不能通过免疫来完全控制，但是 其他传染性疾病可以通过复杂的免疫来控制。癌症有望通过免疫来治疗，但是 临床实验证明此方法效果不佳(Rosenberg，S.A.et al.2004.Nat.Med.10： 909-915，其在此整体引入作为参考)。所以需要新的免疫方法例如能够稳定诱 导抗癌的免疫方法。

树突状细胞(DCs)在先天性免疫和获得性免疫过程中都扮演重要的角色。树 突状细胞是一种特化的抗原递呈细胞，具有以下独特的能力：捕获和加工抗原， 从外周迁移到淋巴器官，并以主要组织相容性复合物(MHC)限制性方式将抗原递 呈给静止T细胞(Banchereau，J.&Steinman，R.M.1998.Nature392：245-252； Steinman，R.M.，et al.2003.Ann Rev Immunol 21：685-711，其各自在此 整体引入作为参考)。这些细胞起源于骨髓(BM)，它们的特点是具有树突状结构 和高移动性。未成熟的树突状细胞可以吞噬抗原，它们像哨兵一样遍布于全身 的外周组织。但是，树突状细胞的成熟对于引发有效的免疫应答非常重要。 (Steinman，R.M.，et al.2003.上文)。成熟的树突状细胞能够表达高水平的 MHC-抗原复合物和其它共刺激分子(例如CD40，B7-1，B7-2和CD1a)。(Steinman， R.M.1991.Ann Rev Immunol 9：271-296，其在此整体引入作为参考； Banchereau，J.and R.M.Steinman.1998.上文)。这些分子在激活T细胞时 发挥重要作用。

树突状细胞作为特化抗原递呈细胞(APCs)的发现促使人们尝试基于DC的 免疫/接种，这涉及用特异性抗原加载树突状细胞(Banchereau，J.&Palucka， A.K.2005.Nat.Rev.Immunol.5：296-306；Figdor，CG.et al.2004.Nat. Med.10：475-480，其各自在此整体引入作为参考)。但是所有这些尝试都涉及 在体外用特异性抗原加载树突状细胞。然后将体外产生的树突状细胞给患者施 用。为每位患者在体外产生树突状细胞是极度耗费劳力的过程。

相反，本发明尤其涉及体内的树突状细胞靶向、抗原加载和激活，这样就 可以通过引发有益的体内免疫应答而有效的对患者进行治疗。本发明因此实现 对于有效和有能力的免疫/接种法的长期需要。

发明概述

在本发明的一个方面，提供将多核苷酸输送到表达DC-SIGN的树突状细胞 的方法。在一些实施方案中，所述方法包括用重组病毒转导树突状细胞，其中， 重组病毒包含待输送的多核苷酸和结合DC-SIGN的靶向分子。在一些实施方案 中，靶向分子对DC-SIGN是特异性的。

在本发明的一些实施方案中，重组病毒包括慢病毒基因组的序列，例如HIV 基因组。

在其他实施方案中，重组病毒包括γ逆转录病毒基因组的序列，如小鼠干 细胞病毒(MSCV)基因组或者小鼠白血病病毒(MLV)基因组的序列。

在本发明的某些实施方案中，所述方法利用包含衍生自至少一种病毒的病 毒糖蛋白的靶向分子，所述病毒选自：辛德比斯病毒、流感病毒、拉沙热病毒， 森林脑炎病毒，登革热病毒，乙肝病毒，狂犬病病毒，塞姆利基森林病毒，罗 斯河(Ross River)病毒，Aura病毒，近东马脑脊髓炎病毒，汉坦病毒，和SARS-CoV 病毒。在更具体的实施方案中，靶向分子包括经过修饰的源自辛德比斯病毒(SIN 或SVG)的病毒糖蛋白。在某些实施方案中，靶向分子是SINmu，也可以被称作 SVGmu(SEQ ID NO：11)。

在一些实施方案中，被输送到树突状细胞的多核苷酸包括下列至少一种： 编码感兴趣的蛋白的基因，编码s iRNA的基因，和编码microRNA的基因。所述 编码感兴趣的蛋白的基因可以编码抗原，例如肿瘤抗原或者HIV抗原。