[发明专利]一种诊断方法和用于此的试剂盒

权利要求书

1.与CD4的细胞质结构域特异性结合的CD4结合抗体或其抗原结 合片段在制备试剂盒中的用途，所述试剂盒用于评估来自受试者的血液 样品中具有CD4的T细胞的数目，所述评估包括：

(i)将样品与能够裂解或透化具有CD4的细胞的试剂接触；

(ii)将样品与CD4结合抗体或其抗原结合片段接触，所述的CD4 结合抗体或其抗原结合片段与CD4的细胞质结构域结合，并形成CD4- 抗体复合物；和

(iii)直接或间接地检测和评估步骤(ii)中形成的CD4-抗体 复合物的水平或存在；并且

其中步骤(ii)中形成的CD4-抗体复合物的水平或存在指示受试 者中具有CD4的细胞的数目，其中所述抗体或其抗原结合片段在步骤 (ii)中不检测缺失细胞质结构域的可溶的CD4，并且由此区别包含细 胞质结构域的细胞结合的CD4和缺失细胞质结构域的可溶的CD4。

2.权利要求1的用途，其中步骤(iii)包括将CD4-抗体复合物 与第二抗体或其抗原结合片段接触，所述的第二抗体或其抗原结合片段 与CD4结合，包括与细胞质或细胞外结构域结合并且其包含检测标记或 其能够与包含检测标记的第三结合伴侣结合，并且检测所述检测标记。

3.权利要求1或2的用途，其中所述评估为酶联免疫吸附测定 (ELISA)类型，流式细胞术或层析法。

4.权利要求3的用途，其中所述评估为ELI SA类型或层析法，并 且与CD4的细胞质结构域特异性结合的抗体或其抗原结合片段固定于固 体支持物上。

5.权利要求1的用途，其中在步骤(ii)中，通过下述将样品与 所述CD4结合抗体或其抗原结合片段接触：将样品用于免疫层析装置的 样品部分，其中所述样品部分可操作地与所述装置的捕获部分连接并且 其中测试样品的组分从样品部分流向并流经捕获部分，所述的捕获部分 包含与CD4的细胞质结构域特异性结合的抗体或其抗原结合片段，以便 只有包含细胞质结构域的CD4，而非不包含细胞质结构域的可溶的CD4， 与所述抗体或其片段结合从而形成CD4-抗体复合物；并且其中在步骤 (iii)中，通过下述来评估CD4-抗体复合物的水平或存在：将所述装 置的捕获部分与第二结合抗体或其抗原结合片段接触，所述的第二结合 抗体或其抗原结合片段与CD4结合，包括与细胞质或细胞外结构域结合 并且其包含检测标记或其能够与包含检测标记的第三或随后的结合伴 侣结合。

6.权利要求1或5的用途，其中将CD4-抗体复合物的水平或存 在与预先确定的对照进行比较，其中所述预先确定的对照为预先确定量 的对照，当与可视检测标记结合时，其足以产生信号，提供与由预先确 定数目的CD4细胞产生的信号等价的可视内标。

7.权利要求6的用途，其中对照为至少包含细胞质结构域的CD4 多肽。

8.权利要求1的用途，其中血液为全血或经稀释的全血或血液衍 生物。

9.权利要求1的用途，其中通过将样品与结合至固体支持物的单 核细胞特异性试剂接触来除尽血液样品中的单核细胞。

10.权利要求9的用途，其中所述单核细胞特异性试剂为抗CD14 抗体。

11.权利要求1的用途，其进一步包括通过将样品与结合至固体支 持物的红细胞捕获试剂接触来除尽样品中的红细胞。

12.权利要求11的用途，其中所述红细胞捕获试剂为抗血型糖蛋 白抗体。