[发明专利]分离细胞的方法和试剂盒无效
申请号: | 200780044716.X | 申请日: | 2007-10-08 |
公开(公告)号: | CN101548005A | 公开(公告)日: | 2009-09-30 |
发明(设计)人: | R·J·奥尔森;R·M·比特纳;A·M·特雷巴;L·L·博热克 | 申请(专利权)人: | 普罗梅加公司 |
主分类号: | C12N1/00 | 分类号: | C12N1/00 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 | 代理人: | 韩威威;左 路 |
地址: | 美国威*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分离 细胞 方法 试剂盒 | ||
1.一种从包含第一种细胞和第二种细胞的样品分离第一种细胞的方 法,其包括:
(a)在裂解所述第二种细胞而不裂解所述第一种细胞的条件下处理 所述样品,以形成含水裂解物;
(b)向样品施加力一段时间,所述时间足以形成包含所述第一种细胞 的沉淀;以及
(c)在所述沉淀和含水裂解物之间形成沉淀固定化封盖。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述第一种细胞是精细胞。
3.如权利要求1或2所述的方法,其还包括除去步骤(c)的所述含水裂 解物。
4.如权利要求1-3任一项所述的方法,其还包括回收所述沉淀。
5.如权利要求4所述的方法,其还包括洗涤所述沉淀。
6.如权利要求3所述的方法,其还包括在除去所述含水裂解物之前, 以密度大于约1.00g/cm3的非水液体接触步骤(c)的所述含水裂解物,以在所 述沉淀固定化封盖和所述含水裂解物之间形成非水层。
7.如权利要求1-6任一项所述的方法,其中通过离心施加所述力。
8.如权利要求1-7任一项所述的方法,其中所述沉淀固定化封盖包含 磁性或顺磁性材料。
9.如权利要求8所述的方法,其还包括向所述磁性或顺磁性材料施加 磁场,以维持所述封盖位于所述精子沉淀和含水材料之间。
10.如权利要求8所述的方法,其中所述顺磁性材料包含二氧化硅。
11.如权利要求8所述的方法,其中所述顺磁性材料包含二氧化硅磁性 颗粒。
12.如权利要求8所述的方法,其中所述顺磁性材料包含覆有含硅氧化 物的磁性颗粒。
13.如权利要求8所述的方法,其中所述顺磁性材料包含集聚的磁性颗 粒,其中每个颗粒包含覆有含硅氧化物的两个或更多的磁性或顺磁性核心。
14.如权利要求8所述的方法,其中所述顺磁性材料包含磁垫。
15.如权利要求1-8任一项所述的方法,其中所述沉淀固定化封盖材料 包含纤维素性磁性颗粒。
16.如权利要求1-8任一项所述的方法,其中所述沉淀固定化封盖材料 包含温度响应性材料。
17.如权利要求1-16任一项所述的方法,其中所述方法以高通量过程进 行。
18.如权利要求7所述的方法,其中所述力大约为3000×g或更小。
19.如权利要求1-18任一项所述的方法,其中所述第二种细胞是上皮细 胞。
20.如权利要求1-19任一项所述的方法,其中所述含水材料包括非精细 胞DNA。
21.如权利要求6所述的方法,其中所述非水液体包括戊二酸二乙酯、 戊二酸二甲酯和1-氯-2-甲基-2-丙醇中的至少一种。
22.如权利要求21所述的方法,其中所述非水液体还包括氯仿。
23.如权利要求22所述的方法,其中所述非水液体包括氯仿和戊二酸 二甲酯,其中戊二酸二甲酯:氯仿二者比例从约0.1:99.9到约50:50。
24.如权利要求10-12任一项所述的方法,其还包括在允许第一种细胞 DNA结合到二氧化硅的条件下裂解所述第一种细胞。
25.如权利要求15所述的方法,其还包括在允许来自所述第一种细胞 的DNA结合到纤维素性物质的条件下裂解所述第一种细胞。
26.如权利要求1-25任一项所述的方法,其中所述含水裂解物包含毛地 黄皂苷,其浓度可有效裂解所述第二种细胞而不裂解所述第一种细胞。
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