[发明专利]抗微生物肽作为对虾中细菌感染抗性标志物的用途

权利要求书

1.用于评估对虾群体抗御致病细菌感染之能力的方法，该方法包括对 取自测试群体未感染动物样品的血细胞中对虾素-3PEN3-1同工型的 mRNA进行定量。

2.权利要求1的方法，该方法还包括定量测定对虾素-3PEN3-2同工 型的mRNA，并测定PEN3-1同工型/PEN3-2同工型的比值。

3.权利要求1和2中任一项的方法，该方法还包括对以下RNA中的 至少一种进行定量：

-对虾素-2(PEN-2)的mRNA；

-富甘氨酸蛋白的mRNA；

-ALF的mRNA。

4.权利要求1和2中任一项的方法，该方法用于评估对虾品系抗御致 病细菌感染的能力，其还包括在取自测试品系未感染动物的血细胞中定量 测定以下RNA中的至少一种：

-溶菌酶的mRNA；

-对虾素-3的mRNA。

5.权利要求4的方法，该方法还包括将一种或多种所述mRNA的量 与同种虾的对照品系未感染动物中同种mRNA的平均量进行比较。

6.权利要求4和5中任一项的方法，该方法还包括对以下至少一对中 两个成员的mRNA量进行比较：

-溶菌酶/对虾素-3；

-溶菌酶/PEN3-2同工型；

-PEN3-1同工型/对虾素-3；

-PEN3-1同工型/PEN3-2同工型。

7.用于评估对虾中致病细菌感染之结局的方法，该方法包括在取自感 染后6至72小时之测试动物的血细胞中定量测定crustin的mRNA。

8.权利要求7的方法，该方法还包括将crustin的mRNA的量与取自 感染前该测试动物的血细胞中同种mRNA的量进行比较。

9.权利要求7和8中任一项的方法，该方法还包括在取自感染后6 至72小时之测试动物的血细胞中定量测定富脯氨酸及半胱氨酸肽的 mRNA，并有利地将这样测定的mRNA量与取自感染前该测试动物的血细 胞中同种mRNA的量进行比较。

10.权利要求7至9中任一项的方法，该方法还包括在取自感染后6 至72小时之测试动物的血细胞中定量测定以下mRNA中的一种或多种：

-溶菌酶的mRNA；

-对虾素-3的mRNA；

-对虾素-3PEN3-1同工型的mRNA，

并有利地将这样测定的每种所选mRNA的量与取自感染前该测试动 物的血细胞中同种mRNA的量进行比较。

11.权利要求7至9中任一项的方法，该方法还包括在取自感染后6 至72小时之测试动物的血细胞中定量测定对虾素-2的mRNA，并有利地 将这样测定的量与取自感染前该测试动物的血细胞中同种mRNA的量进 行比较。

12.权利要求1至11中任一项的方法，其中所述对虾属于细角滨对虾 (L.stylirostris)种。

13.权利要求1至12中任一项的方法，其中所述感染为弧菌病。

14.用于实施权利要求1至13中任一项所定义方法的试剂盒，其中通 过定量RT-PCR对所述转录物进行定量，除了扩增反应及检测扩增产物所 需的缓冲液和试剂之外，所述试剂盒还包含对每种待测定mRNA具有特异 性的至少一对引物。

15.权利要求14的试剂盒，该试剂盒包含对对虾素-3PEN3-1同工型 的mRNA具有特异性的引物对以及对对虾素-3PEN3-2同工型的mRNA 具有特异性的引物对。