[发明专利]改良的重组人类精氨酸I表达系统无效
| 申请号： | 200780045958.0 | 申请日： | 2007-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN101605807A | 公开（公告）日： | 2009-12-16 |
| 发明（设计）人： | 黄予良;先宗树 | 申请（专利权）人： | 康达医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/00 | 分类号： | C07K14/00 |
| 代理公司： | 北京戈程知识产权代理有限公司 | 代理人： | 程 伟 |
| 地址： | 中国香港新界沙田香港科学园科*** | 国省代码： | 中国香港;81 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 改良 重组 人类 精氨酸 表达 系统 | ||
1.一种表达重组人类精氨酸酶I的分离和纯化的核酸分子，其中所述核酸分子包括人类精氨酸酶I的编码序列和一可操作地与之连接的预先设定的启动子序列，所述启动子序列刺激一预先设定的表达系统表达所述人类精氨酸酶I，其中所述核酸序列不包括人类精氨酸酶I mRNA的非编码序列。
2.如权利要求1的分离和纯化核酸分子，其中所述核酸分子进一步包括一编码多个组氨酸的核酸序列。
3.如权利要求2的分离和纯化核酸分子，其中所述核酸序列编码最少六个组氨酸。
4.一种表达重组人类精氨酸酶I的质粒，其中所述质粒包括人类精氨酸酶I的编码序列和一可操作地与之连接的预先设定的启动子序列，所述启动子序列刺激一预先设定的表达系统表达所述人类精氨酸酶I，其中所述质粒不包括人类精氨酸酶I mRNA的非编码序列。
5.如权利要求4的质粒，其中所述质粒包括一编码多个组氨酸的核酸序列。
6.如权利要求5的质粒，其中所核酸序列编码最少六个组氨酸。
7.如权利要求4的质粒，其中所述启动子序列编码一可操作地与所述人类精氨酸酶I编码序列连接的lac操纵子。
8.一种表达重组人类精氨酸酶I的大肠杆菌种，其中所述大肠杆菌包括一核酸分子，所述核酸分子包括人类精氨酸酶I的编码序列和一可操作地与之连接的预先设定的启动子序列，所述启动子序列刺激一预先设定的表达系统表达所述人类精氨酸酶I，其中所述核酸序列不包括人类精氨酸酶I mRNA的非编码序列。
9.如权利要求8的大肠杆菌种，所述核酸分子包括一编码多个组氨酸的核酸序列。
10.如权利要求9的大肠杆菌种，其中所述核酸序列编码最少六个组氨酸。
11.如权利要求8的大肠杆菌种，其中所述核酸分子包括一在一T7启动子下游序列的lac操纵子序列，所述lac操纵子序列可操纵地与所述核酸分子连接。
12.一种生产重组蛋白的方法，所述方法包括：
a)建构一如权利要求8所示的重组大肠杆菌种；
b)以批次发酵法发酵所述重组大肠杆菌细胞；
c)诱导所述重组大肠杆菌细胞以刺激所述重组蛋白的表达；和
d)由所述发酵产品纯化出所述重组蛋白。
13.如权利要求12的方法，其中所述人类精氨酸酶I有最少六个组氨酸与之连结，所述纯化方法包括在一螯合柱中的亲和层析。
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