[发明专利]用于变应原活性测定的标准血清混合物的制备方法及其用途

说明书

技术领域

本发明属于生物技术药物领域，具体涉及一种用于变应原活性测定的标准 血清混合物的制备方法及该标准血清混合物的用途。

背景技术

随着生态环境的改变，人们接触的致敏物质越来越多，导致过敏性疾病的发 病率日趋增加。目前，全球大约有25％的人口受到变态反应性疾病的影响。1998 年WHO正式宣布检测变应原并进行特异性免疫治疗是唯一可以影响过敏性疾病 自然进程的对因治疗方法，并可防止新的过敏发生。

特异性免疫治疗是确定患者的变应原种类后，在非急性期是患者与含该变种 类变应原的制剂反复接触，剂量由小到大逐渐递增，至最佳维持剂量，提高患者 对其耐受性，从而达到控制或减轻过敏症状的一种疗法。所用的变应原制剂，是 指那些从含变应原成分的天然材料(包括昆虫、螨类、真菌、动物的皮毛、花粉、 食物等)中提取变应原，制成一定浓度的溶液，或者经吸附剂或佐剂将其修饰后 制成的用于诊断、预防和治疗过敏病的生物产品。

在过去的数十年来，欧美的专业人士、联盟、机构竭力研发有效的变应原制 品计量方法，虽然相继出现了多种计量方案但均有缺陷因而无一被广泛认可。比 如：以用重量比容积(W/V)来表示变应原提取物的浓度。即把定量的去脂材料(如 1g去脂花粉)加入定量的提取液(如100ml)中，其W/V就是1∶100。此法虽简单 明瞭，但由于所收取花粉本身质量、提取流程等因素造成的差异会导致等W/V 值的产物其成分、含量与效价却不相同。也就是说，W/V单位仅说明了提取物的 浓度，和其效价或活性并无必然联系。再如，用蛋白氮单位(PNU)来标定变应原 提取物中的蛋白质含量，因为变应原中的有效成分主要是蛋白质。然而，并非所 有的蛋白质都具有抗原性；而具抗原性的蛋白质其含量与效价(即所有致敏蛋白 活性的总和)并无一定的相关关系，所以，此法也不能准确评价变应原产品的总 活性。因此，世界卫生组织认为凡以上述两种单位标定的疫苗产品均为未标准 化的产品，因为不同产家、不同批次的产品间的变应原效价无法比较。

欧美分别使用的生物单位(biological unit，BU)与生物等效变态反应单位 (bioequivalent allergy unit，BAU)均是反映变应原制品的总活性效价的指标， 以过敏患者直接皮试的结果来标定。欧洲的BU是通过对20位中等程度过敏患者 进行点刺试验，根据引起与特定浓度的二盐酸组胺所引起的条痕大小一样的变应 原提取物的剂量来确定，以几何平均值统计试验结果。BAU是美国生产变应原制 剂的重要参考标准。对15名高度敏感患者进行皮内试验，依据使患者产生50mm 直径红斑的浓度以所有患者的算术平均值来定该变应原的效价。BU及BAU都是 以病人的体内过敏反应为基础，即测定体内抗变应原IgE抗体，能更准确地评估 总效价。但取决于要有变应性病人以及用以选择病人的标准。

体外测定IgE以测定变应原总生物活性的方法有放射变应原吸附抑制实验 (RAST抑制试验)、酶联免疫吸附抑制试验(ELISA)法用于测量主要变应原。主要 是放射性变应原吸附抑制试验(RAST-I)及在此基础上发展起来的MAST，FAST以 及Pharma-CAP等众多新的体外试验方法等。试验结果取决于组成血清池的组成 以及结合于固相载体上的变应原提取物，二者均不可再生。由于缺乏不同批次之 间稳定的血清池，所以这些方法仍然不能做到变应原制剂的标准化。

由于变应原制剂是从天然原料中提取获得的，原材料的采集时间、地点、方 法、生长环境、提取工艺等的差异都会增加原料质量的变化。此外，变应原本身 是各种变体的复杂混合物，抗原决定簇结构并不完全相同；患者个体免疫反应也 存在差异。现在体外测定变应原活性的方法，均涉及到标准血清，每次收集的血 清存在较大差异。所以，变应原制剂的质量不易控制，免疫疗法成功的关键在于 使用标准化、可持续生产的高质量的变应原制剂。标准化的目的是减少产品在定 性和定量方面的差别，提高安全性、有效性、可靠性和精确性，从而改善变应性 疾病的诊断与治疗现状。变应原制品的活性是变应原制品质量控制的重要指标， 只有确定活性之后才可用于诊断和治疗。测定变应原活性时却存在一定的问题— —标示结果所用的单位并不统一，造成产品间无法相互比较。

因此，本领域迫切需要提供一种检测变应原制品活性的标准血清混合物。

发明内容