[发明专利]快速检测猪伪狂犬抗体的试纸条及其制备方法无效
申请号: | 200810000444.X | 申请日: | 2008-01-10 |
公开(公告)号: | CN101216492A | 公开(公告)日: | 2008-07-09 |
发明(设计)人: | 崔尚金 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
主分类号: | G01N33/571 | 分类号: | G01N33/571;G01N33/558;G01N33/52;G01N33/532 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 | 代理人: | 孙皓晨;费碧华 |
地址: | 150001黑龙江*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 快速 检测 狂犬 抗体 试纸 及其 制备 方法 | ||
1.一种快速检测猪伪狂犬病毒抗体的试纸条,其特征在于:包括样品垫(4)、玻璃纤维膜(3)、硝酸纤维素膜(2)、吸水垫(1)和支持物(5);所述的硝酸纤维素膜含有一条由猪伪狂犬gE蛋白包被而成的检测线(6)和由兔抗猪伪狂犬病毒抗体包被而成的对照线(7);所述的玻璃纤维膜结合有胶体金标记的猪伪狂犬gE蛋白;玻璃纤维膜、硝酸纤维膜和吸水垫按照以下次序相连接并附着在支持物上:玻璃纤维膜与靠近硝酸纤维膜检测线(6)的一端相连接,吸水垫与靠近硝酸纤维膜对照线(7)的一端相连接;样品垫附着在玻璃纤维膜上,样品垫的一端与硝酸纤维素膜相衔接。
2.按照权利要求1所述的试纸条,其特征在于:所述的支持物(5)是塑料板、硬纸板或铝板。
3.按照权利要求1所述的试纸条,其特征在于:所述的兔抗猪伪狂犬抗体按照以下方法制备得到:用猪伪狂犬弱毒抗原采用多点注射法免疫阴性家兔3只,每隔2周加强免疫1次,共进行3次,最后一次免疫10天后采血,分离血清,纯化后,即得。
4.按照权利要求1的试纸条,其特征在于:所述的硝酸纤维素膜能够由尼龙膜替换。
5.按照权利要求1的试纸条,其特征在于:所述硝酸纤维素膜上的检测线和对照线之间的间隔为3-5mm。
6.按照权利要求5的试纸条,其特征在于:所述硝酸纤维素膜上的检测线和对照线之间的间隔为4mm。
7.一种制备权利要求1所述的检测猪伪狂犬病毒抗体的试纸条的方法,包括:
(1)用喷膜机将胶体金标记的猪伪狂犬gE蛋白复合物喷涂在玻璃纤维膜上,备用;
(2)将猪伪狂犬gE蛋白和兔抗猪伪狂犬抗体依次间隔3-5mm喷在硝酸纤维膜上,分别作为检测线和对照线,将包被好的硝酸纤维膜封闭其余蛋白结合位点,洗涤,干燥,备用;
(3)将硝酸纤维膜、玻璃纤维膜、样品垫、吸水垫按照以下次序粘贴在支持板上:将玻璃纤维膜连接在靠近硝酸纤维膜检测线的一端,边缘附着在硝酸纤维素膜上;样品垫附着在玻璃纤维膜上,与硝酸纤维素膜衔接;吸水滤纸板连接在硝酸纤维素膜的另一端,边缘附着在硝酸纤维素膜上;
(4)将粘好的支持板材料切成60mm长、4mm宽的试纸条,即得。
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