[发明专利]凝血酶直接抑制剂多肽水合盐及合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及药品领域，是凝血酶直接抑制剂的多肽水合盐及合成 方法。

背景技术

凝血酶直接抑制剂的多肽部分已有相关的报道(美国专利号为 5433940)，但对其水合盐类并没有提及。在实际合成过程中，如果产 物最后的精制过程是以水合盐的形式存在，由于多肽水合盐易溶于 水，且比较稳定，尤其是盐酸、醋酸盐和三氟醋酸盐在临床应用过程 中，没有毒副作用，是多肽产物最佳存在形式，因此对该化合物水合 盐类的研究是必要的。

相关类型化合物的合成方法国外有文献报道是利用叔丁氧羰基 (t-Boc)氨基酸保护策略的固相合成方法(Maraganore JM.，1989)，该方法的缺点是所使用的裂解剂是HF，由于它的强挥发 性，对人体有强腐蚀性，对环境的破坏也很大，而且在化合物中引进 了氟化物，在临床应用中需严格控制氟的含量，因此后处理很困难， 加大了合成成本。

发明内容

本发明的一个目的是为解决上述现有技术中没有凝血酶直接抑制 剂多肽水合盐、相关类型化合物合成方法处理困难、污染和毒性比较 大的问题，提供一种可用于临床的凝血酶直接抑制剂多肽水合盐，以 及一种简单、方便且对环境没有污染的凝血酶直接抑制剂多肽水合盐 的合成方法。

为实现上述目的，本发明的一个技术方案提供了一种凝血酶直接 抑制剂多肽水合盐：H-D-Phe-Pro-Arg-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn- Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-OH，其多肽水合盐 的通式为C₉₈H₁₃₈N₂₄O₃₃·mX·nH₂O。

X为醋酸、盐酸或三氟醋酸。

m的取值范围为1≤m≤4。

n的取值范围为2≤n≤12。

m的优选取值范围为2≤m≤3

n的优选取值范围为4≤n≤8。

本发明的另一个技术方案提供了一种凝血酶直接抑制剂多肽水合 盐的合成方法，该方法为Fmoc保护氨基酸的多肽固相合成方法；合 成过程包括单个氨基酸偶联和多肽片段偶联。

合成方法以单个氨基酸偶联或多肽片段的形式偶联：

1)根据Fmoc多肽固相合成方法合成多肽片段；

2)将这些不同片段偶联；

3)重复上述4、5和6步骤，直至得到产品。

合成方法为下述步骤：

1、C端第1个氨基酸Fmoc-Leu-Wang树脂的脱保护；

2、C端第2个氨基酸Fmoc-Tyr-OH与Leu-Wang树脂的偶联；

                          |

                          But

3、C端第3-20个氨基酸的偶联；

4、最终产物20肽Fmoc保护的脱除；

5、脱除肽的侧链保护及肽从树脂上的裂解；

6、粗品的纯化；

原料选自合成所需的11种氨基酸：D-苯丙氨酸(D-Phe)、脯氨酸 (Pro)、精氨酸(Arg)、甘氨酸(Gly)、天冬酰胺(Asn)、天冬氨酸 (Asp)、苯丙氨酸(Phe)、谷氨酸(Glu)、异亮氨酸(Ile)、酪氨酸 (Tyr)和亮氨酸(Leu)。

氨基酸的氨基端为没有保护和芴甲氧羰基(Fmoc)保护；氨基酸 的羧基端为没有保护、苄酯(OBzl)保护、甲酯(OMe)保护或乙酯 (OEt)保护中的任意一种或多种。

脱氨基保护的试剂为1-50％的哌啶/溶剂(体积比)，优选体积比 15-25％的哌啶/溶剂；溶剂为N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二氯甲烷(DCM) 或N-甲基吡咯烷酮(NMP)；最终产物从树脂上裂解的裂解剂为95％三 氟醋酸(TFA)：2.5％Y：2.5％H₂O。