[发明专利]一种新疆紫草细胞系和细胞培养生产新疆紫草紫草素的方法无效
申请号: | 200810010878.8 | 申请日: | 2008-04-01 |
公开(公告)号: | CN101289651A | 公开(公告)日: | 2008-10-22 |
发明(设计)人: | 刘汉石 | 申请(专利权)人: | 大连普瑞康生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;C12P7/26;A61K8/97;A61K36/30;A23L1/30 |
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地址: | 116620辽宁省大连*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新疆 紫草 细胞系 细胞培养 生产 方法 | ||
1、一种新疆紫草紫红色细胞系,其通过如下方法制备获得:采用新疆紫草的种胚或种子萌发的无菌苗为外植体,经诱导愈伤组织并反复继代培养,从分离的细胞系中选择颜色鲜艳呈紫红色、结构致密,团块状的培养物,即得。
2、如权利要求1所述的细胞系,其为新疆紫草紫红色细胞系。
3、由权力要求1或2所诉细胞系获得的培养物。
4、权力要求1或2所诉细胞系的继代培养方法,其特征在于所用培养基为含有0.1-0.5mg/LIAA和1-5mg/L KT的N6培养基,培养温度为23~25℃,无光照培养,30~35天继代一次。
5、如权力要求4所述的继代培养方法,其特征在于,继代时选择生长旺盛、颜色鲜艳呈紫红色、结构致密、团块状结构明显的培养物继代。
6、如权利要求5所述的继代培养方法,其特征在于,继代时还包括对培养物中紫草素及其衍生物(β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、去氧紫草素、消旋乙酰阿卡宁、乙酰阿卡宁、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、消旋紫草素、β-羟基异戊酰阿卡宁、1-甲氧基乙酰紫草素、乙酰紫草素等,均属2,4-萘醌类有机化合物)含量进行考察,选择综合性状好的培养物继代。
7、如权利要求3所述培养物的大规模生产方法,其步骤包括:
1)将权力要求1或2所诉细胞系采用液体摇床培养的方法制种;
2)将步骤1)得到的种子用于固体培养;
3)选择步骤2)培养物中生长旺盛、颜色鲜艳、紫红色特征的培养物留种,用于步骤1)的摇床培养,其余收获,得培养物。
8、如权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤1)液体摇床培养所用培养基为添加0.1-0.5mg/L IAA和1-5mg/L KT的N6液体培养基,接种量3-6%,培养条件:PH值为5.2-5.8,培养温度为23-25℃,摇床转速100-120rpm,无光照培养,培养时间8-10天。
9、如权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤2)固体培养选择颜色鲜艳、呈紫红色、长势良好、分散性好、颗粒均匀、无污染的培养物作种子进行固态培养生产,接种到含0.1-0.5mg/L IAA和1-5mg/L KT的N6固体培养基,接种快为4-6mm,培养条件:温度23~25℃,无光照培养,培养30~35天。
10、如权利要求7-9任一项所述的方法,其特征在于,还包括对培养物的紫草素及其衍生物(β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、去氧紫草素、消旋乙酰阿卡宁、乙酰阿卡宁、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、消旋紫草素、β-羟基异戊酰阿卡宁、1-甲氧基乙酰紫草素、乙酰紫草素等,均属2,4-萘醌类有机化合物)含量进行考察,选择综合性状好的培养物留种。
11、权利要求1或2所述细胞系在制备食品、保健食品、化妆品、保健品和药品中应用。
12、权力要求3所述培养物在制备食品、保健食品、化妆品、保健品和药品中应用。
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