[发明专利]具有抗肿瘤活性的香菇发酵粗蛋白、提取方法及其制剂

说明书

技术领域

本发明属于抗肿瘤药物领域，涉及来源于高级真菌经发酵后提取的蛋白产物。

背景技术

真菌作为药物来源已有多年历史，以真菌为材料所生产的药剂在我国很早就应用于临床。香菇是世界名贵的食用兼药用真菌之一，具有很高的营养及药用价值。香菇化学成分复杂、药理活性强、临床应用范围广，其抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能引起国内外学者广泛关注(景军，等.中国食品卫生杂志.2001：13(2)：46-47；Chihara G，et al.CancerRes.1970：30：2776)。现代医学研究认为，多糖类作为生物应答调节剂(BRM)在香菇的抗肿瘤活性中起主要作用，香菇多糖的分离纯化，结构及药理作用都得到了深入的研究，并用于临床肿瘤的治疗，其疗效得到广泛的肯定。香菇多糖是通过刺激免疫细胞成熟、分化和增殖，改善宿主机体平衡从而使免疫状态由低下恢复到接近于正常能力，使肿瘤受抑制来实现其抗肿瘤的功能，但其无直接的抗肿瘤作用[RuanZheng，et al.International Immunopharmacology 5(2005)811-820]。

除多糖外，香菇中含有大量蛋白质、氨基酸和多种微量元素。对香菇中其他生物学活性物质的研究水平去发掘其抗肿瘤活性的本质却鲜有报道。黄敏等在研究香菇C91-3菌株发酵液的抗肿瘤活性中，首次发现并证实了香菇的菌丝体发酵液具有体内抑制肿瘤生长作用，同时还具有显著的体外直接杀伤肿瘤细胞的作用，提示除了香菇多糖外还有其他重要的直接抗肿瘤活性物质，国内外还未见报道(黄敏，等.中国微生态学杂志.1996年：8(3)：38-40)。香菇菌株发酵后的抗肿瘤的成分尤其是蛋白亦未见报道，黄敏等在继续研究中又发现并证实了香菇的菌丝体发酵液提取的蛋白具有体内抑制肿瘤生长作用还具有显著的体外直接杀伤肿瘤细胞的作用(戴兵，黄敏等.浙江医学.2004年：26(9)：656-658)。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的具有抗肿瘤活性的香菇发酵粗蛋白、提取方法及其在抗肿瘤中的应用的制剂。

本发明公开的具抗肿瘤活性的香菇发酵粗蛋白是以香菇C91-3菌株为发酵原料，采用深层发酵的技术，过滤后再经盐析、透析等一系列技术加工而成。

本发明的香菇发酵提取蛋白的制备方法包括以下述步骤：

1.香菇发酵液的制备

(1)香菇发酵液培养基的制备：由如下重量份原料构成的培养基

  葡萄糖  0.5～15  新鲜啤酒酵母  1～16  蔗糖  0.5～15  全脂奶粉  0.5～10  蛋白胨  0.5～10  磷酸二氢钾  0.1～5  维生素B1  0.001～1  维生素B2  0.001～1