[发明专利]一种治疗性乙肝疫苗及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种生物制剂，更具体地说，它涉及用于慢性乙型肝炎的一种治疗性乙肝疫苗，本发明还涉及该疫苗的制备方法和用途。 

背景技术

慢性乙型肝炎是我国常见的传染病之一，我国属乙型肝炎病毒(HBV)高流行区，HBV感染是一个严重的公共卫生问题，但在慢性乙型肝炎治疗方面一直未取得突破性进展。 

直至目前，临床上对慢性乙型肝炎的治疗仍面临着不少的困惑，虽然治疗的总体目标是明确的，即最大限度的长期抑制或消除HBV，减轻肝细胞炎症坏死及纤维化，延缓和阻止疾病的进展等。但在实施过程中还存在着许多困难和争议。HBV的持续存在和复制是导致病情进行性发展的主要原因，因此抗病毒治疗是关键手段，尽管核苷(酸)类似物有了长足的发展，但由于HBV的耐药变异、HBV DNA可能与宿主基因的整合以及环状共价闭合DNA(cccDNA)难以清除等因素，以致抗病毒治疗存在着不彻底性。因此免疫干预的作用应当引起我们的关注，虽然目前还缺乏特异性的免疫干预制剂，但归根结底调动和诱导机体自身的免疫调节机制，是有效治疗慢性乙型肝炎的重要途径。 

大量试验研究及临床观察表明，HBV特异性细胞免疫应答在慢性乙型肝炎病变的发生、发展、转归和清除HBV起着至关重要的作用。在急性HBV感染过程中，多克隆多特异性的细胞免疫应答，使HBV的复制迅速被抑制以致完全清除(Sobau Y，et al.JHepatology，2002)，患者痊愈。而慢性HBV感染者，针对HBV的特异性细胞免疫应答低下，甚至呈现对HBV的免疫耐受状态。增强和促进HBV特异性的CD8⁺毒性T淋巴细胞(CTL)和CD4⁺辅助性T淋巴细胞(HTL)的活化，以非靶细胞损伤为主的清除HBV机制是机体清除HBV的十分重要的方式。活化的CD8⁺CTL一方面分泌IFN-γ、TNF-α等细胞因子，通过抑制前基因组RNA(pgRNA)和缩短细胞核内cccDNA半衰期，抑制以致清除HBV，另外也可通过溶细胞的机制清除HBV。但只有当CD8⁺CTL应答非溶细胞损伤机制不能有效抑制HBV复制时，才启动凋亡和溶细胞的机制，其途径包括穿孔素颗粒酶系统、Fas/Fas配体系统、TNF/TNF受体系统和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体。 

研究表明，慢性乙肝患者外周血存在着高水平的HBV颗粒和HBV蛋白，而且是抑制患者细胞免疫应答低下或耐受的主要原因之一(Schlaak JF，et al.J Hepatol，1999；Chen M，etal.J Virol，2005)。慢性乙型肝炎患者免疫应答功能低下或免疫耐受主要表现为树突状细胞(DCs)包括mDC和pDC数量下降、功能损伤，HTL的功能缺陷、CD8⁺CTL的数量减少和功能下降以及CD4⁺CD25⁺调节性T细胞(Treg细胞)抑制效应细胞和肝细胞外环境 的改变。此外，共抑制分子PDL-1/PD-1信号途径也参与了HBV慢性感染过程中CTL的损伤(Leibsun PJ.Curv Opin Immunol，2004)。还有人指出慢性乙肝患者天然免疫应答也有所减弱，天然免疫在HBV的清除过程中起着重要作用，特别在感染的初期，pDC可先产生IFN-αβ，NK和NKT细胞通过Toll样受体途径被活化即可产生IFN-γ，80％复制高峰期的HBV可被NK、NKT细胞通过分泌细胞因子和细胞毒作用抑制和清除。 

综上所述，慢性乙型肝炎治疗除使用抗HBV药物外，免疫干预治疗是必不可少的重要途径，而后者的主要选择就是以基于细胞因子的免疫治疗(cytokine-basedimmunotherapy)或治疗性疫苗(therapeutic vaccines)(Depla E，et al.J Virol，2007)。