[发明专利]人副流感病毒分型及定量检测试剂盒

权利要求书

1.一种同时对人副流感病毒进行分型和定量的一步法RT-PCR检测试剂盒，该试剂盒包括：1)RNA提取液、HPIV1反应管、HPIV2反应管、HPIV3反应管、经DEPC处理的纯水、阳性质控品、阴性质控品、定量参考品，和2)分隔并集中包装这些试剂瓶或管的包装盒，其中HPIV1反应管由RT-PCR反应缓冲液、一对HPIV1特异性的正、反向引物、一条HPIV1特异性的探针、Taq酶、逆转录酶mMLV和RNA酶抑制剂组成，HPIV2反应管由RT-PCR反应缓冲液、一对HPIV2特异性的正、反向引物、一条HPIV2特异性的探针、Taq酶、逆转录酶mMLV和RNA酶抑制剂组成，HPIV3反应管由RT-PCR反应缓冲液、一对HPIV3特异性的正、反向引物、一条HPIV3特异性的探针、Taq酶、逆转录酶mMLV和RNA酶抑制剂组成，HPIV1反应管中用于HPIV1靶多核苷酸扩增的正向和反向引物的序列分别是5′-GCCATAACAAGTAGTGCTGGTC-3′和5′-ACCTTCAACTGTGTCTCCTGT-3′，用于HPIV1靶多核苷酸扩增和监测体系的寡核苷酸探针的序列是5′-CATTCAGACAGGATGGAACCGTT-3′，探针的两端分别结合有荧光发生基团和荧光淬灭基团，HPIV2反应管中用于HPIV2靶多核苷酸扩增的正向和反向引物的序列分别是5′-TCTGCAGCTATGAGTAATCACAT-3′和5′-GCATCTGGAATGACTCGGAA-3′，用于HPIV2靶多核苷酸扩增和监测体系的寡核苷酸探针的序列是5′-TCACCAGAAGCCAGCATAGATAGAG-3′，探针的两端分别结合有荧光发生基团和荧光淬灭基团，HPIV3反应管中用于HPIV3靶多核苷酸扩增的正向和反向引物的序列分别是5′-CTTTCAGACAAGATGGAACAGT-3′和5′-AAGCTCTGTTGAGACCGCA-3′，用于HPIV3靶多核苷酸扩增和监测体系的寡核苷酸探针的序列是5′-TCCACTGTGTCACCGCTCAATACC-3′，探针的两端分别结合有荧光发生基团和荧光淬灭基团，HPIV1反应管、HPIV2反应管、HPIV3反应管中RT-PCR反应缓冲液均由Tris-Ac、KAc、(NH₄)₂SO₄、DTT、MgSO₄和dNTP组成。

2.一种同时对人副流感病毒进行分型和定量的多色荧光RT-PCR检测试剂盒，该试剂盒包括：1)RNA提取液、多色荧光RT-PCR反应管、经DEPC处理的纯水、阳性质控品、阴性质控品、定量参考品，和2)分隔并集中包装这些试剂瓶或管的包装盒，其中多色荧光RT-PCR反应管由Tris-Ac、KAc、(NH₄)₂SO₄、DTT、MgSO₄、dNTP、mMLV酶、RNasin、Taq酶、三对特异性正、反向引物、三条特异性探针组成，其特征在于用于靶多核苷酸扩增的正向和反向引物的序列分别是5′-GCCATAACAAGTAGTGCTGGTC-3′、5′-ACCTTCAACTGTGTCTCCTGT-3′、5′-TCTGCAGCTATGAGTAATCACAT-3′、5′-GCATCTGGAATGACTCGGAA-3′、5′-CTTTCAGACAAGATGGAACAGT-3′、5′-AAGCTCTGTTGAGACCGCA-3′，用于靶多核苷酸扩增和监测体系的寡核苷酸探针的序列是5′-CATTCAGACAGGATGGAACCGTT-3′、5′-TCACCAGAAGCCAGCATAGATAGAG-3′、5′-TCCACTGTGTCACCGCTCAATACC-3′，三条探针的两端分别结合有不同的荧光发生基团和荧光淬灭基团。